人抗副流感病毒IgG抗體(anti-PIVIgG)hth体育下载地址雙抗體夾心法(檢測未知抗原)

人抗副流感病毒IgG抗體(ti) (anti-PIVIgG)hth体育下载地址雙抗體(ti) 夾心法(檢測未知抗原)

1、用緩衝(chong) 液將抗體(ti) 稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nei) 溶液，用洗滌緩衝(chong) 液洗3次。

2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml於(yu) 上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育1小時。然後洗滌(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。

3、加酶標抗體(ti) ：於(yu) 各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(ti) (經滴定後的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～1小時，洗滌。

4、加底物液顯色：於(yu) 各反應孔中加入臨(lin) 時配製的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鍾。

5、終止反應：於(yu) 各反應孔中加入2M硫酸0.05ml

6、結果判定：可於(yu) 白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內(nei) 顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為(wei) 無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀(yi) 上，於(yu) 450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對照孔調零後測各孔OD值，若大於(yu) 規定的陰性對照OD值的2.1倍，即為(wei) 陽性。