降鈣素hth体育下载地址的正確操作步驟一起來了解下

發布時間：2022-11-15 點擊次數：602

降鈣素hth体育下载地址實驗原理：用純化的PCT抗體包被微孔板，製成固相載體，往微孔中依次加入標本或標準品、化的PCT抗體、HRP標記的親和素，經過*洗滌後用底物（TMB）顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，並在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的PCT呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（值），計算樣品濃度。

　　降鈣素hth体育下载地址操作步驟：

　　實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫，試劑不能直接在37溶解；試劑或樣品配製時，均需充分混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋後的樣品符合試劑盒的檢測範圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。

　　1、加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100，餘孔分別加標準品或待測樣品100，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加於酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37溫育2小時。為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

　　2、棄去液體，甩幹，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液100（臨用前配製），酶標板加上覆膜，37溫育1小時。

　　3、棄去孔內液體，甩幹，洗板3次，每次浸泡1-2分鍾，大約400/每孔，甩幹（也可輕拍將孔內液體拍幹）。

　　4、每孔加檢測溶液B工作液（臨用前配製）100，加上覆膜，37溫育1小時。

　　5、棄去孔內液體，甩幹，洗板5次，方法同步驟3。

　　6、每孔加底物溶液90，酶標板加上覆膜37避光顯色（反應時間控製在15-30分鍾，當標準孔的前3-4孔有明顯的梯度藍色，後3-4孔梯度不明顯時，即可終止）。

　　7、每孔加終止溶液50，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。

　　8、立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度（值）。