hth体育下载地址的包被方式

   有多少人使用elisa試劑盒操作實驗呢?關(guan) 於(yu) elisa試劑盒您又了解關(guan) 少呢?您知道elisa試劑盒的包被形式嗎?今天呢上海恒遠生物將為(wei) 您解說的就是elisa試劑盒的包被形式，elisa實驗的靈敏度較高、特異性也比較好，然而因此特點在臨(lin) 床上得到了較為(wei) 廣泛的應用，操作中的各個(ge) 環節對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，就很有可能會(hui) 導致顯色不全、花板等結果。廢話不多說，我們(men) 將重點放在elisa試劑盒的包被形式上，請您耐心閱讀!

   我們(men) 將抗原或抗體(ti) 固定在過程稱為(wei) 包被。換句話來說，包被就是抗原或抗體(ti) 結合到固相載體(ti) 表麵的過程。

   蛋白質與(yu) 聚苯乙烯固相載體(ti) 是通過物理吸附結合的，靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與(yu) 固相載體(ti) 表麵的疏水基團間的作用於(yu) 。這種物理吸附是非特異性的，受蛋白質的分子量、等電點、濃度等的影響。

   載體(ti) 對不同蛋白質的吸附能力是不相同的，大分子蛋白質較小分子蛋白質通常含有更多的疏水基團，故更易吸附到固相載體(ti) 表麵。IgG對聚苯乙烯等固相具有較強的吸附力，其聯結多發生在Fc段上，抗體(ti) 結合點暴露於(yu) 外，因此抗體(ti) 的包被一般均采用直接吸附法。

   蛋白質抗原大多也可采用與(yu) 抗體(ti) 相似的方法包被。當抗原決(jue) 定簇存在於(yu) 或鄰近於(yu) 疏水區域時，抗原與(yu) 固相載體(ti) 的直接吸附可使抗原決(jue) 定簇不能充分暴露，在這種情況下，直接包被效果不佳，可以采用間接的捕獲包被法，即先將針對該抗原的特異抗體(ti) 作預包被，其後通過抗原抗體(ti) 反應使抗原固相化。此間接結合在固相上的抗原遠離載體(ti) 表麵，其抗原決(jue) 定簇也得以充分暴露。間接包被的抗原經固相抗體(ti) 的親(qin) 和層析作用，包被在固相上的抗原純度大大提高，因此含雜質較多的抗原也可采用捕獲包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善，重複性亦佳。間接包被的另一優(you) 點是抗原用量少，僅(jin) 為(wei) 直接包被的/0乃至於(yu) /00。不易吸附在聚苯乙烯載體(ti) 上的非蛋白質抗原可采用特殊的包被方式。例如，在檢測抗DNA抗體(ti) 時，需用DNA作為(wei) 包被抗原，而普遍的固相載體(ti) 一般不能直接與(yu) 核酸結合。可將聚苯乙烯板先經紫外線照射(例如30W紫外燈，75cm照射2小時)，以增加其吸附性能。

   固相載體(ti) 先用堿性蛋白質，如聚賴氨酸、等作預包被，也可提高核酸的結合力。也可用親(qin) 和素係統作間接包被，即用親(qin) 和素先包被載體(ti) ，然後加入化的DNA，這種包被方法均勻、牢固，已擴大應用於(yu) 各種抗原物質的定量測定。

   而脂類物質無法與(yu) 固相載體(ti) 結合，可將其在有機溶劑中，比如乙醇，溶解後加入ELISA板孔中，開蓋置冰箱過夜或冷風吹幹，待酒精揮發後，讓脂質自然幹固在固相表麵。抗心磷脂抗體(ti) 的ELISA試劑一般采用這種包被方式。

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