免疫組化操作流程

、洗載玻片

將載玻片置於(yu) 重鉻酸鉀和濃H2SO4混合液中，目的是為(wei) 了是載玻片上的矽膠等除去，同時使一些肉眼看不見的凹凸不平的表麵變平整，便於(yu) 組織吸附，然後置於(yu) 清水中清洗，除去殘餘(yu) 的重鉻酸鉀和濃H2SO4（大約衝(chong) 一個(ge) 小時左右），hth体育下载地址再將載玻片浸泡於(yu) 酒精之中， 然後放到架子上，置於(yu) 37oC溫箱中，將多聚賴氨酸塗布於(yu) 玻片的表麵，由於(yu) Lys帶正電，而大多數的組織帶負電荷，從(cong) 而產(chan) 生吸附作用。

2、包埋組織

先在鐵模具中加入一些液態石蠟，先稍微冷卻，然後再將待包埋的組織置於(yu) 石蠟之中，並排列整齊，再將塑料模具盒蓋上，zui後加入少許液體(ti) 石蠟，進行冷凍，使石蠟變成固態。

3、切片

將包埋好的組織從(cong) 模具上取下來，並置於(yu) 石蠟切片機上，切片機通過調節上下左右來來使組織和切割方向一致，然後調節切片的厚度，一般為(wei) 5 um，如果比較難切，則可以適當調整厚度，用毛筆將切割的載玻片向外拉，並用小鑷子將包含有完整組織的載玻片置於(yu) 40 oC溫水中。

4、撈組織hth体育下载地址

當組織載玻片置於(yu) 40 oC溫水中之前，要先將水浴中的氣泡趕走，以免氣泡受熱上浮而貼到組織上，組織受熱展開，是組織不起皺紋，用載玻片撈組織時，一般取載玻片的下/3或者下/2一般每種組織撈5-6張，其中2-3張是備用的，每張載玻片上通常撈兩(liang) 份組織，做對照使用，這樣形成的誤差就比較小了，而且撈載玻片的時候方向一致，以便觀察，再將撈出來的載玻片置於(yu) 架子上，放入37 oC溫箱中烘幹。

5、脫蠟

依次將載玻片放入二甲苯-二甲苯-00%酒精-00%酒精-95%酒精-90%酒精-80%酒精-70%酒精，起脫蠟作用的主要是二甲苯，依據的是相似相溶的原理。一般在每個(ge) 試劑中放0 min，天氣熱可以少放幾分鍾，相反，天氣較冷的話就要適當延長脫蠟時間，一般為(wei) 2-5 min。

6、抗原修複

脫蠟後在清水中衝(chong) 洗一段時間，hth体育下载地址加入3%H2O2浸泡0 min，從(cong) 而除去內(nei) 源性的過氧化氫酶，然後倒掉H2O2，在清水中洗兩(liang) 次，再加入檸檬酸緩衝(chong) 液，放入微波爐中蒸煮3 min（中火），一般剛到沸騰即可，冷卻至室溫，然後再蒸煮一次，冷卻至室溫，蒸煮的目的是為(wei) 了使抗原的位點暴露出來。