ELISA的技術—細胞傷口愈合實驗

hth体育下载地址技術實驗步驟：

. 細胞在含有0%FBS的DMEM培養(yang) 基中生長。

2. 細胞以一定密度接種到24孔細胞培養(yang) 板中，生長24小時後，單層細胞融合度應達到70-80%。

3. 不要更換培養(yang) 基。用新的ml槍頭輕輕的在單層培養(yang) 細胞間劃痕，劃痕橫穿過孔，槍頭盡量與(yu) 板孔的底部垂直，不要傾(qing) 斜。這樣產(chan) 生的gap的距離才與(yu) 槍頭末端的外直徑相等。Gap的距離可以選用不同型號的槍頭調節。劃痕在同一方向成一條直線。

4. 在垂直與(yu) *條劃痕的方向製作另一條劃痕，每孔劃痕成十字交叉型。

5. 劃痕後，用培養(yang) 基輕輕的清洗板孔2次，以去除脫落細胞。

6. 每孔添加新鮮培養(yang) 基。

7. (培養(yang) 基中含有某些成分，如抑製/促進細胞遷移和/或增殖的化學物質)。

8. 細胞生長48小時(或根據時間需要)。

9. xPBS清洗細胞兩(liang) 次，然後使用3.7%多聚甲醛固定30分鍾。

0. 0.%的結晶紫(2%乙醇溶解)染色30分鍾。

. 染色的單層細胞選取不同的視野，顯微鏡拍照。hth体育下载地址gap的距離可通過Photoshop或ImagJ軟件測量.為(wei) 了降低實驗結果的可變性，建議每孔選擇多個(ge) 視野觀察，每組做多個(ge) 重複。

20mg 十七碳酸甲酯 含量測定 常溫，避光 694-20050
20mg 槐角苷 含量測定 常溫，避光 695-20050
20mg 芒柄花素 鑒別 常溫，避光 703-200602
0.2ml (-)-薄荷酮 GC法含量測定 常溫，避光 705-200602
0.2ml 胡薄荷酮 含量測定 常溫，避光 706-20004
20mg ,5-O-二咖啡酰奎寧酸 含量測定 常溫，避光 77-20050
20mg 3，29-二苯甲酰基栝樓仁三醇 常溫，避光 724-
20mg 柳穿魚葉苷 含量測定 常溫，避光 728-2000
20mg 6-羥基-7-甲氧基香豆素 含量測定 常溫，避光 74-20050
20mg 當藥苷 含量測定 常溫，避光 742-20050
ml 正丁醇 含量測定 常溫，避光 743-20050
0mg -羥基-3，4，5-*氧基山酮 含量測定 常溫，避光 744-20050
ml 醋酸乙酯 含量測定 常溫，避光 746-20050
hth体育下载地址20mg 20(S)-原人參二醇 含量測定 常溫，避光 747-20050
20mg 20(S)-人參皂苷Rh2 含量測定 常溫，避光 748-20050
00mg 左旋樟腦 GC法含量測定 常溫，避光 749-20060
0.2ml 薏苡仁油 鑒別 常溫，避光 750-20060