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牛基焦磷酸合酶(GGPS)hth体育下载地址使用說明書
發布時間:2022-11-15      點擊次數:522

試驗原理:
BFGF試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知BFGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nei) 進行檢測。先將BFGF和標記的抗體(ti) 同時溫育。人堿性成纖維細胞生長因子ELISA 檢測試劑盒洗滌後,加入親(qin) 和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然後加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chan) 生顏色。顏色的深淺和樣品中BFGF的濃度呈比例關(guan) 係。
牛基焦磷酸合酶(GGPS)hth体育下载地址自備材料
.蒸餾水。
2.加樣器:5ul、0ul、50ul、00ul、200、500ul、000ul。
3.振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體(ti) ,請盡快用水衝(chong) 洗。
2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒裏的任何成份。
操作注意事項
.試劑應按標簽儲(chu) 存,使用前恢複到室溫。稀稀過後的標準品應丟(diu) 棄,不可保存。
2.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
3.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4.使用一次性的吸頭以免交叉汙染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
5.使用幹淨的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒裏的各種成份及樣品。
6.洗滌酶標板時應充分拍幹,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7.底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露於(yu) 光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成後應立即讀取OD值。
8.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9.按照中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
樣品收集、處理及保存方法
、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nei) 毒素的試管。收集血液後,000×g離心0分鍾將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用於(yu) 檢測。000×g離心30分鍾去除顆粒。
3、細胞上清液---000×g離心0分鍾去除顆粒和聚合物。
4、保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反複冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍並確保樣品均勻地充分解凍。
試劑的準備
標準品:標準品的係列稀釋應在實驗時準備,不能儲(chu) 存。稀釋前將標準品振蕩混勻。
2.洗滌緩衝(chong) 液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
操作步驟
.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體(ti) 產(chan) 生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chan) 生加樣上的誤差。
2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決(jue) 定所需的板條數。每個(ge) 標準品和空白孔建議做複孔。每個(ge) 樣品根據自己的數量來定,能使用複孔的盡量做複孔。
3.加入稀釋好後的標準品50ul於(yu) 反應孔、加入待測樣品50ul於(yu) 反應孔內(nei) 。立即加入50ul的標記的抗體(ti) 。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育小時。
4.甩去孔內(nei) 液體(ti) ,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍幹。重複此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5.每孔加入80ul的親(qin) 和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鍾。
6.甩去孔內(nei) 液體(ti) ,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍幹。重複此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育0分鍾。避免光照。
8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液後應立即測定結果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。
 

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