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抗hth体育下载地址試驗原理:
抗hth体育下载地址試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nei) 進行檢測。先將和標記的抗體(ti) 同時溫育。洗滌後,加入親(qin) 和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然後加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chan) 生顏色。顏色的深淺和樣品中的濃度呈比例關(guan) 係。
自備材料
蒸餾水。
加樣器:5ul、0ul、50ul、00ul、200、500ul、000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體(ti) ,請盡快用水衝(chong) 洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒裏的任何成份。
操作注意事項
試劑應按標簽說明書(shu) 儲(chu) 存,使用前恢複到室溫。稀稀過後的標準品應丟(diu) 棄,不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉汙染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用幹淨的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒裏的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍幹,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露於(yu) 光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成後應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書(shu) 中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
抗hth体育下载地址樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nei) 毒素的試管。收集血液後,000×g離心0分鍾將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用於(yu) 檢測。000×g離心30分鍾去除顆粒。
細胞上清液---000×g離心0分鍾去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。000×g離心0分鍾,取上清液
保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反複冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍並確保樣品均勻地充分解凍。
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