操作步驟:
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體(ti) 產(chan) 生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chan) 生加樣上的誤差。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決(jue) 定所需的板條數。每個(ge) 標準品和空白孔建議做複孔。每個(ge) 樣品根據自己的數量來定,能使用複孔的盡量做複孔。
加入稀釋好後的標準品50ul於(yu) 反應孔、加入待測樣品50ul於(yu) 反應孔內(nei) 。立即加入50ul的標記的抗體(ti) 。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鍾。
甩去孔內(nei) 液體(ti) ,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍幹。重複此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入00ul的親(qin) 和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鍾。
甩去孔內(nei) 液體(ti) ,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍幹。重複此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鍾。避免光照。
取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液後應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。
小鼠(Mouse)(HYD) ELISA檢測試劑盒結 果 判 斷 與(yu) 分 析:
儀(yi) 器值:於(yu) 波長450nm的酶標儀(yi) 上讀取各孔的OD值
以吸光度OD值為(wei) 縱坐標(Y),相應的HYD標準品濃度為(wei) 橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的HYD含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度,再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與(yu) OD值計算出標準曲線的回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為(wei) 樣品的實際濃度。
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