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葡萄糖6磷酸脫氫酶試劑盒使用簡介
發布時間:2022-11-15      點擊次數:485

自備材料:
. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、0ul、50ul、00ul、200ul、500ul、000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

試劑的準備:
. 標準品:標準品的係列稀釋應在實驗時準備,不能儲(chu) 存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:
500pg/ml (6號標準品) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul 
250pg/ml (5號標準品) 00ul的原倍標準品加入00ul的標準品稀釋液 
25pg/ml (4號標準品) 00ul的5號標準品加入00ul的標準品稀釋液 
62.5pg/ml (3號標準品) 00ul的4號標準品加入00ul的標準品稀釋液 
3.2pg/ml (2號標準品) 00ul的3號標準品加入00ul的標準品稀釋液 
5.6pg/ml (號標準品) 00ul的2號標準品加入00ul的標準品稀釋液 
0pg/ml (空白對照) 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul
2. 洗滌緩衝(chong) 液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

操作步驟:
.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體(ti) 產(chan) 生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chan) 生加樣上的誤差。

2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決(jue) 定所需的板條數。每個(ge) 標準品和空白孔建議做複孔。每個(ge) 樣品根據自己的數量來定,能使用複孔的盡量做複孔。
3.加入稀釋好後的標準品50ul於(yu) 反應孔、加入待測樣品50ul於(yu) 反應孔內(nei) 。立即加入50ul的標記的抗體(ti) 。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育45分鍾。
4.甩去孔內(nei) 液體(ti) ,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍幹。重複此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5.每孔加入00ul的親(qin) 和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鍾。
6.甩去孔內(nei) 液體(ti) ,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍幹。重複此操作4次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育5分鍾。避免光照。
8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液後應立即測定結果。

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