試驗原理:
P-selectin試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知P-selectin濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內(nei) 進行檢測。先將P-selectin和標記的抗體(ti) 同時溫育。洗滌後,加入親(qin) 和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然後加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產(chan) 生顏色。顏色的深淺和樣品中P-selectin的濃度呈比例關(guan) 係。
內(nei) 容及其配製
試劑盒成份(2-8℃保存)96孔配置48孔配置配製
96/48人份酶標板塊板(96T)半塊板(48T)即用型
塑料膜板蓋塊半塊即用型
標準品:400pg/ml瓶(0.6ml)瓶(0.3ml)按說明書(shu) 進行稀稀
空轉移趨化生長因子β對照瓶(.0ml)瓶(0.5ml)即用型
標準品稀釋緩衝(chong) 液瓶(5ml)瓶(2.5ml)即用型
標記的抗P-selectin抗體(ti) 瓶(6ml)瓶(3.0ml)即用型
親(qin) 和鏈酶素-HRP瓶(0ml)瓶(5.0ml)即用型
洗滌緩衝(chong) 液瓶(20ml)瓶(0ml)按說明書(shu) 進行稀釋
底物A瓶(6.0ml)瓶(3.0ml)即用型
底物B瓶(6.0ml)瓶(3.0ml)即用型
終止液瓶(6.0ml)瓶(3.0ml)即用型
標本稀釋液瓶(2ml)瓶(6.0ml)即用型
自備材料
蒸餾水。
加樣器:5ul、0ul、50ul、00ul、200ul、500ul、000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。
安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體(ti) ,請盡快用水衝(chong) 洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒裏的任何成份。
操作注意事項
試劑應按標簽說明書(shu) 儲(chu) 存,使用前恢複到室溫。稀稀過後的標準品應丟(diu) 棄,不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉汙染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用幹淨的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒裏的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍幹,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露於(yu) 光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成後應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書(shu) 中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
電話
微信掃一掃