產(chan) 品及特點
本產(chan) 品是在本公司柱式土壤DNAOUT（CAT：7205-50）基礎上開發而
得的大提升級產(chan) 品，用於(yu) 從(cong) 各種土壤樣品和河海沉積物中大量提取高質量的
DNA的試劑。跟柱式土壤DNAOUT相比它具有下列特點：
. 處理量大，一次zui多可以處理20克的土壤樣品。
2. 去汙染效果更好，得到的DNA可以直接作為(wei) PCR模板或酶切，不需要
再進行去腐殖酸處理。
3. 操作過程更加簡單快速，整個(ge) 操作隻需要0多分鍾，擴容性好。
4. 產(chan) 量高，每克土壤一般可以提取到5-50 ug DNA，片段長度在20-50 Kb，
OD260/280一般都在.8以上。
5. 適合於(yu) 各種土壤（包括河海沉積物）。
規格及成分
成 份 4次包裝（80928）
溶液A 50 mL
溶液B 50 mL
溶液C 00 mL
離心吸附柱 4套
通用洗柱液 00 mL
通用洗脫液 0 mL
使用手冊(ce) 份

運輸及保存 常溫運輸，4℃保存，保存期為(wei) 一年。
自備試劑 氯仿。
使用方法
. 65℃預熱溶液A，待其沉澱溶化後充分混勻，取0 mL加入到.5 mL
塑料離心管中並放置於(yu) 65℃待用。
2. 稱取3-20 g的土壤，加入到含預熱溶液A的離心管中，震蕩器上劇烈震
蕩5-0分鍾。
3. 將離心管置於(yu) 65℃水浴中保溫至少5分鍾。
4. 5000-7000 rpm室溫離心3-5分鍾，將上清轉移到一新離心管中（上清
液一般呈淡黃色或深棕色，實際顏色取決(jue) 於(yu) 腐殖酸的含量，上清液的體(ti) 積
一般為(wei) 6-8 mL）。
5. 在上清液中加入等體(ti) 積的溶液B，上下顛倒30秒充分混勻，溶液將呈白
色或淡黃色混濁狀。
6. 將離心管冰浴至少5分鍾。
7. 5000-7000 rpm室溫離心3-5分鍾，轉移上清到新的50 mL離心管中，
上清液顏色將比第4步得到的上清的顏色稍淡，體(ti) 積在4 mL左右。
注意：下麵第8-第9步的氯仿抽提操作可以省略，直接進入第0步，但DNA
的產(chan) 量會(hui) 低50%左右，OD260/280在.7-.8。
8. 加入4 mL的氯仿（自備），震蕩器上充分振蕩30秒混勻。注意:一定要讓
管底的溶液震蕩起來。
9. 5000-7000 rpm室溫離心3-5分鍾，小心轉移上清到新離心管中，體(ti) 積
在 mL左右。說明：離心後兩(liang) 相交界麵將有白色膜狀物，其中有機相
部分顏色較深，一般呈淡棕色。上清的顏色取決(jue) 於(yu) 土壤中腐殖酸的含量。
0. 加入.5倍體(ti) 積的溶液C，上下顛倒30秒混勻。
. 分兩(liang) 次上柱（即先轉移一半的混合液到離心吸附柱中，5000-7000 rpm
室溫離心分鍾，棄穿透液，然後再將剩下的混合液到離心吸附柱中，
5000-7000 rpm室溫離心半分鍾，棄穿透液）。
2. 加0 mL通用洗柱液到離心吸附柱中，5000-7000 rpm室溫離心分
鍾，棄穿透液。
3. 重複上個(ge) 步驟一次。
4. 5000-7000 rpm室溫再離心半分鍾。此步十分重要，否則殘留的通用洗
柱液會(hui) 汙染DNA。
5. 將離心吸附柱轉移到一新的50 mL塑料離心管中，加入 mL 通用洗脫
液。
6. 室溫放置離心吸附柱-2分鍾。
7. 5000-7000 rpm室溫離心半分鍾，離心管中溶液即為(wei) DNA樣品。