產(chan) 品及特點 本產(chan) 品是天澤基因植物RNAOUT（CAT#：3080）的柱式升級產(chan) 品，它結合了植物RNAOUT的性（其效果在近五十多種各類植物中得到驗證，植物名單見植物RNAOUT產(chan) 品介紹的附錄）和天澤基因柱式純化係列產(chan) 品的快捷性。該產(chan) 品特點如下：
. 操作更加簡單快速，處理一個(ge) 樣品隻需要約十分鍾，比植物RNAOUT快一倍。
2. RNA純度更高，平均 OD260/280一般都在2.0左右，能夠有效去除大多數植物中的多糖汙染。
3. 小RNA回收效率更高。
4. 適用於(yu) 所有用植物RNAOUT能提出RNA的植物（注:對有些植物可能需要在溶液A中額外添加RVC）。
5. 得到的RNA可直接用於(yu) RT-PCR、Northern雜交、cDNA合成等實驗。
6. 性價(jia) 比高於(yu) 進口的柱式植物RNA提取產(chan) 品。
7. 一站式，提供RNase-free的樣品收集管。
規格及成分 成 份 50次包裝
溶液A 50 mL
溶液B 5 mL
溶液C 50 mL
離心吸附柱 50套
通用洗柱液 50 mL
RNA洗脫液 0 mL
使用手冊(ce) 份

運輸及保存 常溫運輸，4℃保存，有效期一年。
自備試劑 氯仿。
使用方法 . 估算組織細胞的用量。每次微量提取一般需要00-200 mg植物葉片、或50-00 mg植物種子、或200-500 mg植物果實。
2. 先將新鮮植物切成小塊（保存在RNALOCKER中的植物組織需用紙吸去RNALOCKER液體(ti) 後再剪切成小塊），放入0-5 mL塑料離心管中，加入 mL溶液A，然後用勻漿器勻漿5-20秒。勻漿時會(hui) 產(chan) 生泡沫，但不影響提取效果。也可以使用液氮硯磨法破碎植物組織，硯磨完後加入 mL溶液A。注意：溶解溶液A沉澱。溶液A在4℃放置後可能會(hui) 產(chan) 生沉澱，使用前必須放在65℃水浴使沉澱*溶解並充分搖勻後再取用。
3. 將勻漿物或硯磨物轉移至幹淨的.5 mL塑料離心管中（可以不必轉移非液體(ti) 的細胞碎片）。有的植物組織（比如果實）含有大量水份，勻漿液會(hui) 多於(yu) mL，轉移時也隻取 mL。
4. 在離心管中加入0.3 mL的溶液B和0.2 mL自備氯仿，在振蕩器上振蕩30秒混勻，此時溶液呈均勻的乳濁狀。振蕩器振蕩時必須使管底溶液震蕩起來。
5. 室溫2000-5000 g離心3-5分鍾，兩(liang) 相間將有約5-0毫米厚的細胞破碎物。
6. 將上清液（約0.6 mL）轉移到另一幹淨的.5 mL塑料離心管中，下層有機相和中間層含有DNA、蛋白質和其他雜質，避免觸及或吸取。留下00 uL上清液不取。
7. 加入等體(ti) 積的溶液C，充分顛倒混勻。如果有沉澱產(chan) 生（對某些植物，屬於(yu) 正常現象），千萬(wan) 不要去掉沉澱，一定要把所有的混合物上柱。
8. 將一半的溶液（如果有沉澱，則先混勻）轉移到離心吸附柱中，3000-5000 g室溫離心半分鍾，棄穿透液。
9. 將剩下的一半溶液（如果有沉澱，則先混勻）轉移到同一離心吸附柱中， 3000-5000 g室溫離心半分鍾，棄穿透液。
0. 加0.7 mL通用洗柱液，室溫離心半分鍾，棄穿透液。再加0.3 mL通用洗柱液，室溫離心半分鍾，棄穿透液。一般樣品如此洗滌兩(liang) 次即可，但如果在第7步加入溶液C後有沉澱產(chan) 生，則需要洗三次，每次加入的通用洗滌液的量分別為(wei) 0.4、0.3和0.3 mL。
. 室溫離心半分鍾。此步十分重要，否則殘留的乙醇會(hui) 影響RNA的使用。
2. 將離心吸附柱轉移到RNase-free收集管中，加入50-00 uL RNA洗脫液，室溫放置-2分鍾。
3. 3000-5000 g室溫離心半分鍾，離心管中溶液即為(wei) RNA樣品，可以立即使用或存放於(yu) -80℃待用。
4. RNA完整性的電泳檢測：如果需要做Northern雜交，強烈建議用戶使用甲醛變性膠進行RNA電泳，因為(wei) 非變性膠不能分離所有的RNA分子（BioTechniques，28：44，2000）。
5. RNA產(chan) 量產(chan) 率測定：將5-0 μL RNA溶於(yu) TE緩衝(chong) 液中（pH7.5-8.2之間）檢測其在OD260的光吸收。通過光吸收可以得出RNA濃度（ OD260的RNA=40 μg/mL），進而計算出RNA的產(chan) 量（濃度X體(ti) 積）和產(chan) 率（RNA產(chan) 量/組織用量）。
6. RNA純度測定：無汙染的總RNA的OD260/OD280一般在.8-2.之間（具體(ti) 數值與(yu) 其堿基組成和溶液成分等多種因素有關(guan) ），高於(yu) 此範圍則分別表示樣品可能有蛋白質汙染，但一般不影響RT-PCR等反應。