高遷移率族蛋白1免費代測試劑盒說明書(shu)

檢測範圍：12.5pg/mL~400pg/mL

保存條件：2-8℃低溫保存

保質期：6個(ge) 月，所有試劑盒均提供批次。

試劑盒成分：酶標板，試劑，標準品等。

選型：

產(chan) 品規格：96T/48T

96T指可以做94個(ge) 標本-2個(ge) 標準對照-84個(ge) 樣本

48T指可以做47個(ge) 標本-1個(ge) 標準對照-42個(ge) 樣本主要成分：酶標板,試劑,標準品等。

試劑盒種屬：馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉(cang) 鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。

檢測目的：用於(yu) 測定血清，血漿及相關(guan) 液體(ti) 等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yang) 上清、組織勻漿等標本..

試劑盒組成：

120 倍濃縮洗滌液30ml×1 瓶7終止液6ml×1 瓶

2酶標試劑6ml×1 瓶8標準品（270ng/L）0.5ml×1 瓶

3酶標包被板12 孔×8 條9標準品稀釋液1.5ml×1 瓶

4樣品稀釋液6ml×1 瓶10說明書(shu) 1 份

5顯色劑 A 液6ml×1 瓶11封板膜2 張

6顯色劑 B 液6ml×1/瓶12密封袋1 個(ge)

樣本要求：

1．標本采集後盡早進行提取，提取按相關(guan) 文獻進行，提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放於(yu) -20℃保存，但應避免反複凍融。

2．不能檢測含 NaN3 的樣品，因 NaN3 抑製辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

2400 ng/L5 號標準品150µl 的原倍標準品加入 150µl 標準品稀釋液

1200ng/L4 號標準品150µl 的 5 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

600ng/L 3 號標準品150µl 的 4 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

300ng/L2 號標準品150µl 的 3 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

150ng/L1 號標準品150µl 的 2 號標準品加入 150µl 標準品稀釋液

使用方法：

測定法的靈敏度來自作為(wei) 報告的酶。，酶是一種有機催化劑，很少量的酶即可誘導大量的催化反應，產(chan) 生可供觀察的顯色反應現象。因此該體(ti) 係常被稱為(wei) 酶放大體(ti) 係。

1. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。   24μg/ml    5號標準品    150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

 12μg/ml    4號標準品    150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

 6μg/ml     3號標準品    150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

 3μg/ml     2號標準品    150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

 1.5μg/ml   1號標準品    150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然後再加待測樣品10μl。加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。|

3. 溫育：用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾。   

4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體(ti) ，甩幹，每孔加滿洗滌液，靜置30秒後棄去，如此重複5次，拍幹。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鍾.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液後15分鍾以內(nei) 進行。 

實驗注意事項：

1、手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標板內(nei) 的液體(ti) ；在實驗台上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將推薦的洗滌緩衝(chong) 液至少0.4ml注入孔內(nei) ，浸泡1-2分鍾，根據需要，重複此過程數次。

2、自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用後再用到正式實驗過程中。

3、隻有全部使用KA&M-BIO配套試劑才能保證檢測效果，因為(wei) 所有試劑都是有關(guan) 聯的，不能混用其他製造商的產(chan) 品。隻有嚴(yan) 格遵守KA&M-BIO試劑盒的說明操作才會(hui) 得到的檢測結果。

4、在儲(chu) 存及孵育過程中避免將試劑暴露在強光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發和汙染，試劑避免受到微生物的汙染，因為(wei) 蛋白水解酶的幹擾將導致出現錯誤的結果。

5、濃洗滌液會(hui) 有鹽析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶。 

6、剛開啟的酶標板孔中可能會(hui) 有少許水樣物質，此為(wei) 正常現象，不會(hui) 對實驗結果造成任何影響。

7、所有的樣品都應管理好，按照規定的程序處理樣品和檢測裝置。

8、有效期：6個(ge) 月。