扁豆凝集素（LCA）ELISA免費代測試劑盒說明書(shu)

【中文名稱】：扁豆凝集素（LCA）ELISA免費代測試劑盒
【產(chan) 品規格】：96T/48T。
【保存條件】：2-8℃低溫保存
【保質期】：6個(ge) 月，所有試劑盒均提供批次。
【試劑盒成分】：酶標板，試劑，標準品等。hth体育下载地址檢測範圍：人、綿羊、小鼠、大鼠、豬、兔、山羊、牛、馬、豬、其它動物細胞因子、植物細胞因子、骨代謝、細胞凋亡、激素內(nei) 分泌、活性多肽、肝纖維化、自身抗體(ti) 、血栓與(yu) 止血、腫瘤、自身抗體(ti) 科研Elisa檢測試劑盒。 主要用於(yu) 科研方麵，不用於(yu) 臨(lin) 床診斷。可以用於(yu) 檢測各種指標。
扁豆凝集素（LCA）ELISA免費代測試劑盒實驗原理
本試劑盒應用雙抗體(ti) 夾心法測定標本中(VC)水平。用純化的(VC)抗體(ti) 包被微孔板，製成固相抗體(ti) ，往包被單抗的微孔中依次加入(VC)，再與(yu) HRP標記的(VC)抗體(ti) 結合，形成抗體(ti) -抗原-酶標抗體(ti) 複合物，經過*洗滌後加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，並在酸的作用下轉化成終的黃色。顏色的深淺和樣品中的(VC)呈正相關(guan) 。用酶標儀(yi) 在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中(VC)濃度。 
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樣本處理及要求
 
.組織標本：切割標本後，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化後仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20 分鍾左右（2000-3000 轉/分）。仔細收集上清。分裝後一份待檢測，其餘(yu) 冷凍備用。
 
2. 標本采集後盡早進行提取，提取按相關(guan) 文獻進行，提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放於(yu) -20℃保存，但應避免反複凍融.
 
3. 不能檢測含NaN3 的樣品，因NaN3 抑製辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
 
操作步驟
 
.標準品的加樣：設置標準品孔和樣本孔，標準品孔各加不同濃度的標準品50μL
 
2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其餘(yu) 各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然後再加待測樣品0μl（樣品終稀釋度為(wei) 5倍）。加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
 
3.加酶：每孔加入酶標試劑00μl，空白孔除外。
 
4.溫育：用封板膜封板後置37℃溫育60分鍾。
 
5.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋後備用。
 
6.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體(ti) ，甩幹，每孔加滿洗滌液，靜置30秒後棄去，如此重複5次，拍幹。
 
7.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色5分鍾.
 
8.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
 
9.測定：以空白孔調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液後5分鍾以內(nei) 進行。
注意事項
 
. 試劑盒從(cong) 冷藏環境中取出應在室溫平衡5-30 分鍾後方可使用，酶標包被板開封後如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
 
2. 濃洗滌液可能會(hui) 有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
 
3. 各步加樣均應使用加樣器，並經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控製在5 分鍾內(nei) ，如標本數量多，使用排槍加樣。
 
4. 請每次測定的同時做標準曲線，做複孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD 值大於(yu) 標準品孔di一孔的OD 值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n 倍）後再測定，計算時請zui後乘以總稀釋倍數（×n×5）。
 
5. 封板膜隻限一次性使用，以避免交叉汙染。
 
6. 底物請避光保存。
 
7. 嚴(yan) 格按照說明書(shu) 的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀(yi) 讀數為(wei) 準.
 
8. 所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳(chuan) 染物處理。
 
9. 本試劑不同批號組分不得混用。
 
0. 試劑盒2-8℃冷藏，保質期6個(ge) 月。