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谘詢電話:18321818584檢測說明:
規格:48t/96t
保存:2~8℃
有效期:6個(ge) 月
樣本:血清、血漿、細胞上清液、尿液、體(ti) 液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特點:敏感性高、特異性強、重複性好、試劑穩定、易保存,操作簡便。
用途:用於(yu) 測定血清,血漿及相關(guan) 液體(ti) 樣本中相關(guan) 含量或活性。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
運輸方式:現貨供應,一般為(wei) 快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。
檢測原理:采用雙抗體(ti) 夾心ABC-ELISA法。
標本要求:
包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細胞培養(yang) 上清等。
.血清:
室溫血液自然凝固0-20分鍾後,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。
2.血漿:
應根據標本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為(wei) 抗凝劑,混合0-20分鍾後,離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。
3.尿液:
用無菌管收集。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實行。
4.細胞培養(yang) 上清:
檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nei) 的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到00萬(wan) /ml左右。通過反複凍融,以使細胞破壞並放出細胞內(nei) 成份。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉澱形成,應再次離心。
5.組織標本:
切割標本後,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化後仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鍾左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝後一份待檢測,其餘(yu) 冷凍備用。
兔子Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)hth体育下载地址操作步驟:
、使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體(ti) 產(chan) 生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chan) 生加樣上的誤差。
2、根據待測樣品數量加上標準品的數量決(jue) 定所需的板條數。每個(ge) 標準品和空白孔建議做複孔。每個(ge) 樣品根據自己的數量來定,能使用複孔的盡量做複孔。
3、加入稀釋好後的標準品50ul於(yu) 反應孔、加入待測樣品50ul於(yu) 反應孔內(nei) 。立即加入50ul的標記的抗體(ti) 。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育小時。
4、甩去孔內(nei) 液體(ti) ,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍幹。重複此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5、每孔加入80ul的親(qin) 和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鍾。
6、甩去孔內(nei) 液體(ti) ,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍幹。重複此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7、每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育0分鍾。避免光照。
8、取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液後應立即測定結果。
9、在450nm波長處測定各孔的OD值。
特點:
、專(zhuan) 一性強。抗原與(yu) 抗體(ti) 的免疫反應是專(zhuan) 一反應,而免疫酶技術以免疫反應為(wei) 基礎,所檢測的對象是抗原(或抗體(ti) ),使用的抗體(ti) 除標記了酶以外,與(yu) 普通抗體(ti) 的免疫反應特性並無多大差別。
2、靈敏度高。由於(yu) 抗體(ti) 聯結上了酶,因此,借助於(yu) 酶與(yu) 底物的顯色反應,顯示抗原與(yu) 抗體(ti) 的結合,大大提高了檢測的靈敏性,使檢測水平接近放射免疫測定法。
3、樣品易保存。經過酶反應顯示的有色產(chan) 物大多比較穩定,因此有利於(yu) 樣品的保存。
4、結果易觀察。對檢測結果即可用肉眼觀察,又可用顯微鏡觀察,也可以用分光光度計進行比色測定,還可用顯微鏡觀察。這是因為(wei) 某些酶反應產(chan) 物能使電子密度發生改變,從(cong) 而引起被檢測物的顯示。
5、可以定量測定。溶液中的抗原物質,應用酶免吸附技術進行比色測定,依據光密度值的變化,可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內(nei) 的抗原進行免疫酶技術的定量測定。
6、可以大規模測定樣品。如有成千上萬(wan) 份樣品需要進行檢測,免疫酶技術都能在較短時間內(nei) 完成。
7、.儀(yi) 器和試劑簡單。對免疫沒技術來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊儀(yi) 器,所用儀(yi) 器及試劑均屬一般性儀(yi) 器與(yu) 試劑,普通實驗室及生產(chan) 應用單位均易購置。
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