說明書(shu) ：

一、服務

      我們(men) 可以根據您的應用需要，比如在檢測範圍、種屬以及靈敏度等方麵有特殊要求，而量身定製檢測試劑盒，有效控製檢測試劑成本。並可提供免費代測。

二、ELISA檢測概述

      ELISA（酶聯接免疫吸附反應分析）是以免疫學反應為(wei) 基礎，將抗原、抗體(ti) 的特異性反應與(yu) 酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。 由於(yu) 抗原、抗體(ti) 的反應在一種固相載體(ti) -聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行，每加入一種試劑孵育後，可通過洗滌除去多餘(yu) 的遊離反應物，從(cong) 而保證試驗結果的特異性與(yu) 穩定性。

      實際應用中，通過不同的設計，具體(ti) 的方法步驟可有多種。即：用於(yu) 檢測抗體(ti) 的間接法、用於(yu) 檢測抗原的雙抗體(ti) 夾心法以及用於(yu) 檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭(zheng) 法等等。目前我們(men) 對客戶提供比較常用的ELISA雙抗體(ti) 夾心法及ELISA間接法服務。

三、技術流程

雙抗體(ti) 夾心法(檢測未知抗原)    間接法(檢測未知抗體(ti) )
、用緩衝(chong) 液將抗體(ti) 稀釋至-0ug/ml。在反應孔中加0.ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nei) 溶液，用洗滌緩衝(chong) 液洗3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.05ml於(yu) 上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育小時。然後洗滌(同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體(ti) ：於(yu) 各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(ti) (經滴定後的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5～小時，洗滌。
4、加底物液顯色：於(yu) 各反應孔中加入臨(lin) 時配製的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鍾。
5、終止反應：於(yu) 各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定：可於(yu) 白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內(nei) 顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為(wei) 無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀(yi) 上，於(yu) 450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對照孔調零後測各孔OD值，若大於(yu) 規定的陰性對照OD值的2.倍，即為(wei) 陽性。    、用包被緩衝(chong) 液將已知抗原稀釋至-0ug/ml， 每孔加0.ml，4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣：加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體(ti) )0.05ml於(yu) 上述已包被之反應孔中,置37℃孵育小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體(ti) ：於(yu) 反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(ti) (抗抗體(ti) )0.05ml，37℃孵育30-60分鍾，洗滌,zui後一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色：於(yu) 各反應孔中加入臨(lin) 時配製的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鍾。
5、終止反應：於(yu) 各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定：可於(yu) 白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內(nei) 顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為(wei) 無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀(yi) 上，於(yu) 450nm(若以ABTS顯色，則40nm)處，以空白對照孔調零後測各孔OD值，若大於(yu) 規定的陰性對照OD值的2.倍，即為(wei) 陽性。
四、客戶須知

、液體(ti) 類標本（細胞培養(yang) 上清、組織勻漿、血清、血漿、尿液、胸水、腹水、腦脊液等）；

2、樣本保存：請盡早檢測，2-8℃保存一天；需更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存。如需周期收集樣本，請將樣本及時分裝標號後，置-20℃或-70℃保存；

3、請提前告訴我們(men) ：您樣本的種屬、樣本數量、待測指標及其他特殊要求。

五、報告內(nei) 容及標準

、ELISA標準曲線；

2、詳細的實驗步驟；

3、完整的實驗報告（試劑耗材，實驗方法，實驗結果及結果說明）；

4、實驗進行階段，我公司客服人員會(hui) 及時向您匯報實驗進程。