人轉錄因子E2F1試劑盒激活方法與檢測程序方法

激活方法：

1. 將450ul 標本稀釋液加入到一支 1.5ml 進口聚丙烯管中 , 再加 10ul 血清或血漿標本。

2. 加20ul 1 N HC I ,蓋緊，上下混勻。 2 － 8 ℃ 放置60± 2 分鍾。

3. 加20ul 1 N NaOH, 蓋緊，上下混勻。

4. 即用，或放-20/-70 ℃ 保存3 天。計算結果時乘 以稀釋倍數 50 。 （ 注意：不同的標本E2F1 的水平可能有較大差異，請根據實際情況靈活掌握稀釋度）

5. 細胞培養(yang) 上清或組織勻漿 10 倍稀釋 (410ul 的標本稀釋液＋ 50ul 樣本＋ 20ul 的 1N HCI+20ul 的 1N NaOH) 。

檢測程序

1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品（已激活） 100ul ，將反應板充分混勻後置 37 ℃ 120 分鍾。

2. 洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印幹。

3. 每孔中加入第一抗體(ti) 工作液10 0ul 。將反應板充分混勻後置 37 ℃ 6 0 分鍾。

4. 洗板：同前。

5. 每孔加酶標抗體(ti) 工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鍾。

6. 洗板：同前。

7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應15 分鍾。

8. 每孔加入100ul 終止液混勻。

9. 30分鍾內(nei) 用酶標儀(yi) 在 45 0 nm 處測 吸光值。

人腎皮質近曲小管上皮細胞；HK-2

人腎小管上皮細胞；HKC

人胚胎膀胱組織來源細胞；CCC-HB-2

人胚胎氣管組織來源細胞；CCC-HBE-2

人胚腎二倍體(ti) 細胞；CCC-HEK-1

人胚肝二倍體(ti) 細胞；CCC-HEL-1

人胚胎心肌組織來源細胞；CCC-HEH-2

人胚胎腸粘膜組織來源細胞；CCC-HIE-2

人胚胎胰腺組織來源細胞；CCC-HPE-2

人胚胎肌肉組織來源細胞；CCC-HSM-2

人葡萄膜黑色素細胞；UM

人胚肺成纖維細胞；WI-38 [WI38]

SV40T轉化的人胚腎細胞（亞(ya) 係）；293T/17

293來源病毒包裝細胞；ΦA

293來源病毒包裝細胞；ΦA-GP

人永生化表皮細胞；HaCaT

SV-40轉化肺成纖維細胞；WI38/VA13

人乳腺上皮細胞；MCF-10A

人胚肺成纖維細胞；MRC-5

人胚肺二倍體(ti) 細胞；2BS

人胚肺二倍體(ti) 細胞；KMB-17

人胚腎細胞；293 [HEK-293]

人臍靜脈內(nei) 皮細胞；HUV-EC

人肺細胞；HLF-a

人胚肺成纖維細胞；WI-38 [WI38]

人胎兒(er) 胸腺細胞株；HFT-8810 [HFT8810]

人胚肺成纖維細胞；HFL1

人胚腎細胞；293 [HEK-293]

人羊膜細胞；HA

人胚肺成纖維細胞；HFL-I

人肝細胞；HL-7702[L-02]

人肝細胞；QSG-7701 [QSG7701]

人胚肺成纖維細胞；WI-38 [WI38]