人延伸蛋白A(EloA)hth体育下载地址​洗滌方法

洗滌方法：

. 自動洗板機：每孔加入洗滌液350μl，注入與(yu) 吸出間隔60秒。洗板5次。

2. 手工洗板：甩盡孔內(nei) 液體(ti) ，在潔淨的吸水紙上拍幹，每孔加洗滌液350μl，浸泡-2分鍾，吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內(nei) 的液體(ti) ，在厚的吸水紙上拍幹。洗板5次。

實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫；試劑或樣品配製時，均需充分混勻，並盡量避免起泡。

.加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液00μl，餘(yu) 孔分別加標準品或待測樣品00μl，注意不要有氣泡，加樣時將樣品加於(yu) 酶標板底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。給酶標板覆膜，37℃孵育2小時。為(wei) 保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

2.棄去液體(ti) ，甩幹，每個(ge) 孔中加入Detection Ab工作液 00μl(在使用前5分鍾內(nei) 配製)，酶標板加上覆膜，37℃溫育小時。

3.棄去孔內(nei) 液體(ti) ，甩幹，洗板 3次，每次浸泡-2分鍾，大約350μl /每孔，甩幹並在吸水紙上輕拍將孔內(nei) 液體(ti) 拍幹。

4.每孔加HRP Conjugate工作液(臨(lin) 用前5分鍾內(nei) 配製)00μl，加上覆膜，37℃溫育小時。

5.棄去孔內(nei) 液體(ti) ，甩幹，洗板5次，方法同步驟3。

6.每孔加底物溶液00μl，酶標板加上覆膜37℃避光孵育5分鍾左右(根據實際顯色情況酌情縮短或延長，但不可超過30分鍾。當標準孔出現明顯梯度時，即可終止)。

7.每孔加終止液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與(yu) 底物液的加入順序相同。

8.立即用酶標儀(yi) 在450nm波長測量各孔的光密度(OD值)。應提前打開酶標儀(yi) 電源，預熱儀(yi) 器，設置好檢測程序。

9.實驗完畢後將未用完的試劑按規定的保存溫度放回冰箱保存至有效期結束。

小鼠骨髓間充質幹細胞（BMSCs）

MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞

MM, 小鼠小膠質細胞

mCF, 小鼠心髒成纖維細胞

MN-c, 小鼠皮質神經元

 細胞名稱

人絨毛膜毛細血管內(nei) 皮細胞

人羊膜上皮細胞

人絨毛間充質成纖維細胞

人羊膜間充質基質細胞

人絨毛膜間充質基質細胞

 細胞名稱

NRK-52E，大鼠腎細胞

H9c2大鼠心肌細胞（ATCC來源）

NIH/3T3, 小鼠成纖維細胞係

大鼠骨髓間充質幹細胞（BMSCs）

HSC-T6, 大鼠肝星狀細胞係

CHO, 中國倉(cang) 鼠卵巢細胞係

COS-7L, 非洲綠猴腎成纖維細胞

SF9, 昆蟲卵巢細胞

BRL 3A, 大鼠肝正常細胞

HK-2, 人腎皮質近曲小管上皮細胞

HET-A, 人食管上皮細胞

RGC-5, 小鼠視網膜神經節細胞

GC-, 鼠精原細胞

293A，人胚腎上皮細胞係（腺病毒包裝級別）

hDPSCs, 人前磨牙牙髓幹細胞

293T, SV40轉化的人胚腎上皮細胞係

EPC, 大鼠血管內(nei) 皮祖細胞

HBE, 正常人支氣管上皮細胞係

HL-02 [L-02,HL-7702], 正常人肝上皮細胞

HUVEC-2, 人臍靜脈血管內(nei) 皮細胞係

HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞

HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞