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hth体育下载地址實驗條件的選擇

發布時間:2022-11-15      點擊次數:550

  在hth体育下载地址實驗中,選擇各種實驗條件至關(guan) 重要,包括:


  一、固相載體(ti) 的選擇:許多物質可以作為(wei) 固相載體(ti) ,如聚氯乙烯、聚苯乙烯和聚丙烯。酰胺和纖維素等。其形式可為(wei) 凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。無論什麽(me) 樣的載體(ti) ,在使用前都可以進行篩選:用等量的抗原包,在同一實驗條件下反應,觀察其顯色反應是否均勻,判斷其吸附性能是否良好。


  二、包被抗體(ti) (或抗原)的選擇:將抗體(ti) (或抗原)吸附在固相載體(ti) 表麵時,純度好,吸附時一般要求PH在9.0-9.6之間。吸附溫度、時間及其蛋白質量也有一定的影響,一般采用4℃、8-24小時。蛋白質包的較佳濃度需要滴定:用不同的蛋白質濃度(0...0和0μg/ml等)包定後,在其他試驗條件相同的情況下,觀察陽性標本的OD值。選擇OD值較大、蛋白量較少的濃度。大多數蛋白質通常為(wei) -0μg/ml。


  三、酶標記抗體(ti) 工作濃度的選擇:首先用直接hth体育下载地址法進行初步效果的DDT(見酶標記抗體(ti) 部分)。然後固定其他條件或采用方陣法,正式實驗係統正確滴下其工作濃度。


  四、酶的底部物質和氫化物質的選擇:氫化物質的選擇要求有明顯的顯色反應,但本身沒有顏色。有些氫體(ti) (OPD等)具有潛在致癌作用,應注意防護。有條件的人必須使用不致癌、敏感度高的氫氣體(ti) 。例如TMB和ABTS是目前令人滿意的氫氣體(ti) 。底部作用一段時間後,應加強酸或強堿終止反應。通常,底部的作用時間建議是0-30分鍾。底部物質的使用液必須新鮮配製,特別是在使用前加入過氧化氫水。(內(nei) 容僅(jin) 供參考,有問題或遇到問題請在線谘詢,我們(men) 會(hui) 竭誠為(wei) 您服務)


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