小鼠肺泡上皮細胞培養方法

培養(yang) 方法：

、細胞傳(chuan) 代：細胞密度達到80-90%時即可傳(chuan) 代
①棄去培養(yang) 上清，用PBS或生理鹽水清洗-2次；
②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個(ge) 瓶或皿，蓋好放入培養(yang) 箱消化；
③-2min後，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況後加入*培養(yang) 基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yang) 箱繼續消化至可以輕輕吹打下為(wei) 止；
④將細胞懸液000RPM左右條件下離心4min，棄上清；
⑤用新鮮培養(yang) 基重懸後加入培養(yang) 瓶或皿中，T25培養(yang) 瓶加6-8ml培養(yang) 基；
⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉澱重懸後分到新培養(yang) 瓶中。
2、細胞複蘇：
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間min左右，加入4-5ml培養(yang) 基混勻。
②在000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加-2ml培養(yang) 基吹勻，將細胞懸液加入培養(yang) 瓶中，補加適量培養(yang) 基。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態良好時進行細胞凍存保種
①棄去培養(yang) 上清，用PBS或生理鹽水清洗-2次，加入mL 0.25%（T25瓶）
②-2min後，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況後加入*培養(yang) 基終止消化；
③將細胞懸液000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加ml凍存液重懸細胞；
④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時後將凍存管轉入液氮罐儲(chu) 存。

A2780/TAXOL人卵巢癌耐藥株
LOVO/ADR人結腸癌耐藥株
HCT-8/VCR人結腸癌長春新堿耐藥細胞株
PATU8988/FU人胰腺癌氟耐藥株
Hela/TAXOL人宮頸癌耐藥細胞株
Bxpc3/DDP人胰腺腫瘤耐藥株
Hela/DDP人宮頸癌耐藥株
CNE2/DDP人鼻咽癌耐藥株
A375/DDP人惡性黑色素瘤耐藥株
HT-29/DDP人結直腸腺癌耐藥株
SMMC772/DDP人肝癌耐藥株
SK-MES-/DDP人肺鱗癌耐藥株
T-24/DDP人膀胱移行細胞癌耐細胞株
A549/DDP人肺癌耐藥株
SGC790/DDP人胃癌耐藥株
K562/ADR人白血病耐藥株
A549/TAXOL人肺癌耐藥株
MCF7/Taxol人乳腺癌耐藥株
SMMC-772/Sorafenib人肝癌索拉非尼耐藥株
Huh-7/Sorafenib人肝癌索拉非尼耐藥株
A549/耐藥株人肺癌耐藥株
SGC790/V人胃癌長春新堿耐藥
A2780/V人卵巢癌長春新堿耐藥株
HCT8/V人結腸癌長春新堿耐藥株
HL-60/Adr人白血病耐藥株
K562/Adr人白血病耐藥株
A2780/Adr人卵巢癌耐藥株