惡臭醋酸杆菌混濁變種培養基的配製

培養(yang) 基的配製：

）、Camp-BAP固體(ti) 培養(yang) 基的配製：
稱取8.92g培養(yang) 基，溶於(yu) 200ml蒸餾水中高壓滅菌，待冷卻至55°C左右加入200ul添加劑A、200ul添加劑B和0ml脫纖維裂解羊血，充分搖勻後倒平板。(添加劑A和B為(wei) 購買(mai) 附帶)。
2）、Skirrow固體(ti) 培養(yang) 基的配製：
稱取8.5g培養(yang) 基，溶於(yu) 200ml蒸餾水中高壓滅菌，待冷卻至55°C左右加入2ml FBP原液和0ml脫纖維裂解羊血，充分搖勻後倒平板。
FBP原液配置：
分別稱取0.5g焦亞(ya) 硫酸鈉、0.5g丙酮酸鈉和0.5g，溶於(yu) 20ml蒸餾水中，濾膜過濾除菌，放置4°C冰箱可保存一周。
3）、布氏肉湯增菌液的配製：
稱取28.g布氏肉湯粉末，溶解於(yu) 000ml蒸餾水中高壓滅菌，冷卻後備用。

2、增菌培養(yang)
寬鱗大孔菌將新鮮食品，如雞肉，減碎，取5g置於(yu) 50ml離心管中，加入布氏肉湯至液麵覆蓋雞肉樣品，擰緊離心管，先在37°C下預增菌4小時，在加入00 ul（30mg/ml），並顛倒混勻，放置在微需氧培養(yang) 箱中42°C培養(yang) 48小時。

3、分離純化

用接種環沾取增菌液劃線於(yu) Skirrow血平板上，在平板上挑取不溶血、灰色、有光澤、且邊緣整齊發亮的菌落在Camp-BAP平板上純化，挑取扁平、灰色、像水滴樣菌落多次純化後保存。

4、菌株培養(yang)

將純化的彎曲杆菌單菌落接種到Skirrow血平板上，放置在42°C的微需氧環境下培養(yang) 48小時，觀察細菌生長狀態。微需氧條件的創造可用微需氧產(chan) 氣袋和密閉培養(yang) 罐，也可以用微需氧培養(yang) 箱（三氣培養(yang) 箱）培養(yang) 。

5、菌株保存方法

挑取單克隆菌株在Skirrow固體(ti) 培養(yang) 基上平板劃線，放置在42°C的微需氧環境下培養(yang) 48小時，用滅菌棉簽從(cong) 平板上刮下長出的菌落，懸浮在50%甘油的布氏肉湯保種液中，置於(yu) -80°C超低溫保存。在-20°C冰箱中保存效果較差，存放一周後細菌複蘇率即顯著下降。此外，保存菌株需要每隔一年重新活化保存一次。