的保溫方法:
溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體(ti) 結合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時,實驗表明,兩(liang) 次抗原抗體(ti) 反應一般在37℃經~2小時,產(chan) 物的生成可達。為(wei) 加速反應,可提高反應的溫度,有些試驗在43℃進行,但不宜采用更高的溫度。抗原抗體(ti) 反應4℃更為(wei) *,在放射免疫測定中多使反應在冰箱中,以形成zui多的沉澱。但因所需時間太長,在elisa試劑盒白介素類中一般不予采用。保溫的方式除有的ELISA儀(yi) 器附有特製的電熱塊外,一般均采用水浴,可將hth体育下载地址板置於(yu) 水浴箱中,ELISA板底應貼著水麵,使溫度迅速平衡。為(wei) 避免蒸發,板上應加蓋,也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔,此時可讓反應板漂浮在水麵上。若用保溫箱,hth体育下载地址應放在濕盒內(nei) ,濕盒要選用傳(chuan) 熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui後將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規定的溫度,特別是在氣溫較低的時候更應如此。無論是水浴還是濕盒溫育,反應板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應,操作時的室溫應嚴(yan) 格限製在規定的範圍內(nei) ,標準室溫溫度是指20~25℃,但具體(ti) 操作時可根據說明書(shu) 的要求控製溫育。室溫溫育時,elisa試劑盒 白介素類隻要平置於(yu) 操作台上即可。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。為(wei) 保證這一點,一個(ge) 人操作時,一次不宜多於(yu) 兩(liang) 塊板同時測定。
ELISA(酶聯接免疫吸附反應分析)是以免疫學反應為(wei) 基礎,將抗原、抗體(ti) 的特異性反應與(yu) 酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的實驗技術。 由於(yu) 抗原、抗體(ti) 的反應在一種固相載體(ti) -聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育後,可通過洗滌除去多餘(yu) 的遊離反應物,從(cong) 而保證試驗結果的特異性與(yu) 穩定性。
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