南非諾卡菌探針法熒光定量PCR試劑盒實驗方法步驟

實驗方法步驟：

方法

：在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     

0×PCR buffer                   

5 μl     dNTP mix （2mM）             

4 μl     引物（0pM）                 

2 μl     引物2（0pM）                 

2 μl     Taq酶 （2U/μl）               

μl     DNA模板（50ng-μg/μl）  

μl      加ddH2O至 50 μl  

視PCR儀(yi) 有無熱蓋，產(chan) 品僅(jin) 用於(yu) 科研不加或添加石蠟油。

2：調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀(yi) 上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，在72℃ 保溫7min。

3：結束反應，PCR產(chan) 物放置於(yu) 4℃待電泳檢測或-20℃保存。

4：PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用00μl進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-0μl電泳檢測。

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