間接法步驟:
() 抗原包被:用包被液將PEDV抗原作∶5稀釋包被反應板,每孔00μl,同時設陰性細胞培養(yang) 物對照孔,置4℃過夜。
(2) 洗滌:用洗滌液洗滌2次,每次2min,瀝幹。
(3) 加入被檢血清:用保溫液將被檢血清作∶00稀釋,加入反應板相鄰的兩(liang) 個(ge) 孔中,每孔00μl。同時作陰、陽性標準血清對照,置37℃孵育h。
(4) 洗滌3次:方法同上。
(5) 加入酶結合物:用保溫液將酶結合物作∶4 000稀釋,加入反應孔中,每孔00μl,置37℃孵育h。
(6) 洗滌3次:方法同上。
(7) 加入底物:每孔00μl,置室溫暗盒內(nei) 顯色20min。
(8) 加入終止液:每孔50μl,靜置5min。
(9) 測定OD值:用檢測儀(yi) ,於(yu) 492nm波長,按儀(yi) 器使用及製定標準要求調節儀(yi) 器,測定各反應孔的OD值,記錄結果。
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