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蜜蜂球囊菌PCR檢測試劑盒實驗方法步驟

發布時間:2022-11-15      點擊次數:538

今天,我司技能專(zhuan) 員為(wei) 您解析實驗方法步驟

方法
:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。     
0×PCR buffer                   
5 μl     dNTP mix (2mM)             
4 μl     引物(0pM)                 
2 μl     引物2(0pM)                 
2 μl     Taq酶 (2U/μl)               
μl     DNA模板(50ng-μg/μl) 
μl      加ddH2O至 50 μl 
視PCR儀(yi) 有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀(yi) 上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放線放線杆菌探針法熒光定量PCR試劑盒結束反應,PCR產(chan) 物放置於(yu) 4℃待電泳檢測或-20℃保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用00μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-0μl電泳檢測。
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