人神經降壓素elisa檢測試劑盒雙抗體夾心法

雙抗體(ti) 夾心法
.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩衝(chong) 液將抗體(ti) 稀釋至蛋白質含量為(wei) ～0μg/ml。在每個(ge) 聚苯乙烯板的反應孔中加0.ml，4℃ 過夜。次日，棄去孔內(nei) 溶液，用洗滌緩衝(chong) 液洗3次，每次3分鍾。（簡稱洗滌，下同）。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.ml於(yu) 上述已包被之反應孔中，置37℃ 孵育小時。然後洗滌。（同時做空白孔，陰性對照孔及陽性對照孔）。
3. 加酶標抗體(ti) ：於(yu) 各反應孔中，加入新鮮稀釋的酶標抗體(ti) （經滴定後的稀釋度）0.ml。37℃ 孵育0.5～小時，洗滌。
4. 加底物液顯色：於(yu) 各反應孔中加入臨(lin) 時配製的TMB底物溶液0.ml，37℃ 0～30分鍾。
5. 終止反應：於(yu) 各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結果判定：可於(yu) 白色背景上，直接用肉眼觀察結果：反應孔內(nei) 顏色越深，陽性程度越強，陰性反應為(wei) 無色或極淺，依據所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號表示。也可測OD值：在ELISA檢測儀(yi) 上，於(yu) 450nm（若以ABTS顯色，則40nm）處，以空白對照孔調零後測各孔OD值，若大於(yu) 規定的陰性對照OD值的2.倍，即為(wei) 陽性。