科研hth体育下载地址實驗土壤/植物樣本的處理方法步驟

實驗土壤/植物樣本的處理方法

植物標本的精采集及保存 

、 稱取0.g（誤差±3%以內(nei) ）新鮮植物組織樣本，在液氮中充分研磨；

2、 加入ml的提取液（80%甲醇）, 置於(yu) -20度過夜；

3、 於(yu) 4度，8000rpm，離心小時，取上清；

5、 上樣前加入pH7.4 PBS緩衝(chong) 液（ml定容）。混勻後室溫放置30分鍾，然後4度離心（8000rpm，5分鍾），取上清並暫時保存於(yu) 4度待用。

實驗土壤/植物樣本的處理方法

植物標本的精采集及保存 
、 稱取0.g（誤差±3%以內(nei) ）新鮮植物組織樣本，在液氮中充分研磨；

2、 加入ml的提取液（80%甲醇）, 置於(yu) -20度過夜；

3、 於(yu) 4度，8000rpm，離心小時，取上清；

4、 上樣前加入pH7.4 PBS緩衝(chong) 液（ml定容）。混勻後室溫放置30分鍾，然後4度離心（8000rpm，5分鍾），取上清並暫時保存於(yu) 4度待用。

5.植物標本中相關(guan) 酶或蛋白的測定：（粗提取）

、 新鮮植物組織請在液氮中充分研磨；

2、 加入樣品體(ti) 積9倍的提取液（pH 7.4 PBS緩衝(chong) 液）,3、 請於(yu) 4度，8000rpm，離心30分鍾，取上清並暫時保存於(yu) 4度待用。

土壤：稱取g土壤，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手工將標本充分混勻。2-8℃條件離心20分鍾左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清。分裝一份待檢測，其餘(yu) 冷凍備用，保存過程中如有沉澱形成，應再次離心。如果是測分泌蛋白，直接取上清檢測，測試細胞內(nei) 蛋白，要破碎細胞。

5.植物標本中相關(guan) 酶或蛋白的測定：（粗提取）

、 新鮮植物組織請在液氮中充分研磨；

2、 加入樣品體(ti) 積9倍的提取液（pH 7.4 PBS緩衝(chong) 液）,3、 請於(yu) 4度，8000rpm，離心30分鍾，取上清並暫時保存於(yu) 4度待用。

土壤：稱取g土壤，加入9g的pH7.2-7.4左右的PBS，用手工將標本充分混勻。2-8℃條件離心20分鍾左右（2000-3000轉/分），仔細收集上清。分裝一份待檢測，其餘(yu) 冷凍備用，保存過程中如有沉澱形成，應再次離心。如果是測分泌蛋白，直接取上清檢測，測試細胞內(nei) 蛋白，要破碎細胞。

6、 上清液過C-8固相萃取柱。具體(ti) 步驟是： 80%甲醇（ml）平衡柱→上樣→收集樣品→移開樣品後用00%甲醇（5ml）洗柱→00%yimi（5ml）洗柱→00%甲醇（5ml）洗柱→循環。過柱後的樣本真空幹燥或氮氣吹幹，保存備用；