大鼠腫瘤壞死因子α（TNF-α）酶聯免疫分析試劑盒

標本要求 

．標本采集後盡早進行提取，提取按相關(guan) 文獻進行，提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放於(yu) -20℃保存，但應避免反複凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑製辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

.標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

360ng/L 5號標準品 50μl的原倍標準品加入50μl標準品稀釋液

80ng/L 4號標準品 50μl的5號標準品加入50μl標準品稀釋液

90ng/L 3號標準品 50μl的4號標準品加入50μl標準品稀釋液

45ng/L 2號標準品 50μl的3號標準品加入50μl標準品稀釋液

22.5ng/L 號標準品 50μl的2號標準品加入50μl標準品稀釋液

2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其餘(yu) 各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然後再加待測樣品0μl（樣品終稀釋度為(wei) 5倍）。加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.溫育：用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾。   

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體(ti) ，甩幹，每孔加滿洗滌液，靜置30秒後棄去，如此重複5次，拍幹。

6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色0分鍾.

0.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

.測定：以空白孔調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液後5分鍾以內(nei) 進行。

標本要求 

．標本采集後盡早進行提取，提取按相關(guan) 文獻進行，提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放於(yu) -20℃保存，但應避免反複凍融

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑製辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

保存條件及有效期
．試劑盒保存：；2-8℃。
2．有效期：6個(ge) 月