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魚脂多糖(LPS)hth体育下载地址操作步驟及保存方法

發布時間:2022-11-15      點擊次數:564

操作步驟
)使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體(ti) 產(chan) 生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產(chan) 生加樣上的誤差。
2)根據待測樣品數量加上標準品的數量決(jue) 定所需的板條數。每個(ge) 標準品和空白孔建議做複孔。每個(ge) 樣品根據自己的數量來定,能使用複孔的盡量做複孔。標本用標本稀釋液:稀釋後加入50ul於(yu) 反應孔內(nei) 。
3)加入稀釋好後的標準品50ul於(yu) 反應孔、加入待測樣品50ul於(yu) 反應孔內(nei) 。立即加入50ul的標記的抗體(ti) 。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育小時。
4)甩去孔內(nei) 液體(ti) ,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍幹。重複此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5)每孔加入80ul的親(qin) 和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鍾。
6)甩去孔內(nei) 液體(ti) ,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍幹。重複此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7)每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育0分鍾。避免光照。
8)取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液後應立即測定結果。
9)在450nm波長處測定各孔的OD值。

魚脂多糖(LPS)hth体育下载地址樣品收集、處理及保存方法
)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內(nei) 毒素的試管。收集血液後,000×g離心0分鍾將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用於(yu) 檢測。000×g離心30分鍾去除顆粒。
3)細胞上清液---000×g離心0分鍾去除顆粒和聚合物。
4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。000×g離心0分鍾,取上清液
5)保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反複冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍並確保樣品均勻地充分解凍。

 

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