問題一:國產(chan) hth体育下载地址說明書(shu) 上說洗板時要把孔裏的水甩幹,可我做的時候,無論我怎麽(me) 拍,孔底還是有殘留液體(ti) ,請問這對試驗有沒有影響?或著有沒有別的什麽(me) 好的辦法可以解決(jue) 這個(ge) 問題?
答:有一定的影響.尤其二抗反應後洗滌不好,會(hui) 出現非特異.ELISA試驗中洗滌是關(guan) 鍵.盡可能甩幹,而且盡量少拍,不一定每次都很幹,但是zui後一次洗滌要盡量幹.洗滌中另一個(ge) 值得注意的是盡量不要出氣泡. 如果有條件的話,可用洗板機。
問題二:什麽(me) 才叫封閉好了呢?有沒有什麽(me) 標準?
答:一般用%BSA,50μl,37度,2h,如果還有非特異反應的話,可能有其他原因,比如加樣時濺到了壁上或有氣泡,洗滌不充分,二抗濃度過高,封閉物不合適以及反應條件是否得當等。
問題三:%bsa,你是用什麽(me) 稀釋的,我用過pH9.6的cbs和pH7.4的pbs稀釋,結果封閉的效果都不怎麽(me) 明顯,與(yu) 不封閉差不多.
答:%BSA用PBS稀釋就可以了。還有就是要注意你的操作,國產(chan) hth体育下载地址背景高不一定是封閉的問題。
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