進口hth体育下载地址的洗滌在ELISA進程中雖不是一個(ge) 反應進程,但卻也決(jue) 議著實驗的勝敗。ELSIA?是靠洗刷來到達別離遊離的和聯絡的酶符號物的目的。通過洗刷以*殘留在板孔中沒能與(yu) 固相抗原或抗體(ti) 聯絡的物質,以及在反應進程中非特異性地吸附於(yu) 固相載體(ti) 的煩擾物質。聚苯乙烯等塑料對蛋白質的吸附是普遍性的,而在洗刷時又應把這種非特異性吸附的煩擾物質洗刷下來。可以說在ELISA操作中,洗刷是zui主要的關(guan) 鍵技術,應導致操作者的高度重視,操作者應嚴(yan) 厲按懇求洗刷,不得大意。
洗刷的方法除某些ELISA儀(yi) 器配有格外的主動洗刷儀(yi) 外,手工操作有浸泡式和流水衝(chong) 刷式兩(liang) 種,進程如下:
浸泡式
a.吸幹或甩幹孔內(nei) 反應液;
b.用洗刷液過洗一遍(將洗刷液注滿板孔後,即甩去);
c.浸泡,即將洗刷液注滿板孔,放置-2分鍾,間歇搖晃,浸泡時間不可隨意縮短;
d.吸幹孔內(nei) 液體(ti) 。吸幹應*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體(ti) 後在清洗毛巾或吸水紙上拍幹;
e.重複操作c和d,洗刷3-4次(或按說明規矩)。
hth体育下载地址在間接法中如本底較高,可增加洗刷次數或延伸浸泡時間。
微量滴定板多選用浸泡式洗刷法。
洗刷液多為(wei) 含非離子型洗刷劑的中性緩衝(chong) 液。
聚苯乙烯載體(ti) 與(yu) 蛋白質的聯絡是疏水性的,非離子型洗刷劑既含疏水基團,也含親(qin) 水基團,其疏水基團與(yu) 蛋白質的疏水基團借疏水鍵聯絡,然後削弱蛋白質與(yu) 固相載體(ti) 的聯絡,並借助於(yu) 親(qin) 水基團和水分子的聯絡效果,使蛋白質回複到水溶液情況,然後脫離固相載體(ti) 。洗刷液中的非離子型洗刷劑通常是吐溫20,其濃度可在0.05%-0.2%之間,高於(yu) 0.2%時,可使包被在固相上的抗原或抗體(ti) 解吸附而減低實驗的靈敏度。
流水衝(chong) 刷式 流水衝(chong) 刷法開端用於(yu) 小珠載體(ti) 的洗刷,洗刷液僅(jin) 為(wei) 蒸餾水乃至可用自來水。
洗刷時附接一格外設備,使小珠在流水衝(chong) 擊下不斷地翻滾淋洗,持續衝(chong) 刷2分鍾後,吸幹液體(ti) ,再用蒸餾水浸泡2分鍾,吸幹即可。
浸泡式猶如盆浴,流水衝(chong) 刷式則比方淋浴,其洗刷效果更為(wei) *,且也簡潔、敏捷。已有實驗標明,流水衝(chong) 刷式一樣也適用於(yu) 微量滴定板的洗刷。
進口hth体育下载地址洗刷時設法加大水流量或加大水壓,讓水流衝(chong) 擊板孔表麵,洗刷效果更佳。
正十九酸甲酯 Methyl nonadecanoate BR 25毫升
正十二烷 Dodecane AR,98% 20毫克
正十二硫醇 -Dodecanethiol AR,99% 00克
正十二醇 Dodecanol BR,99% 5克
正三十六烷 Hexatriacontane AR,39% 5克
正硼酸 Boric acid 高純,98% 500克
正磷酸鈉 TSP 特純,98% 00克
正釩酸鈉 Sodium orthovanadate CP 500克
正二十七烷 Heptacosane AR,99% 25克
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