在進口hth体育下载地址中一般有兩(liang) 次抗原抗體(ti) 反應,即加標本和加酶結合物後。
ELISA屬固相免疫測定,抗原、抗體(ti) 的結合隻在固相表麵上發生。以抗體(ti) 包被的夾心法為(wei) 例,加入板孔中的標本,其中的抗原並不是都有均等的和固相抗結合的機會(hui) ,隻有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與(yu) 抗體(ti) 接觸。
我公司技術員說到:這是一個(ge) 逐步平衡的過程,因此需經擴散才能達到反應的終點。在其後加入的酶標記抗體(ti) 與(yu) 固相抗原的結合也同樣如此。這就是為(wei) 什麽(me) ELISA反應總是需要一定時間的溫育。
溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃(冰箱溫度)等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度,也是大多數抗原抗體(ti) 結合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時,實驗表明,兩(liang) 次抗原抗體(ti) 反應一般在37℃經-2小時,產(chan) 物的生成可達。
為(wei) 加速反應,可提高反應的溫度,有些試驗在43℃進行,但不宜采用更高的溫度。抗原抗體(ti) 反應4℃更為(wei) *,在放射免疫測定中多使反應在冰箱中過夜,以形成zui多的沉澱。但因所需時間太長,在ELISA中一般不予采用。
若用保溫箱,進口hth体育下载地址板應放在濕盒內(nei) ,濕盒要選用傳(chuan) 熱性良好的材料如金屬等,在盒底墊濕的紗布,zui後將ELISA板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規定的溫度,特別是在氣溫較低的時候更應如此。無論是水浴還是濕盒溫育,反應板均不宜疊放,以保證各板的溫度都能迅速平衡。
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