新手必須知道的Elisa的實驗步驟

進口hth体育下载地址基礎是抗原或抗體(ti) 的固相化及抗原或抗體(ti) 的酶標記。結合在固相載體(ti) 表麵的抗原或抗體(ti) 仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體(ti) 既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體(ti) 或抗原）與(yu) 固相載體(ti) 表麵的抗原或抗體(ti) 起反應。用洗滌的方法使固相載體(ti) 上形成的抗原抗體(ti) 複合物與(yu) 液體(ti) 中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體(ti) ，也通過反應而結合在固相載體(ti) 上。此時固相上的酶量與(yu) 標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物後，底物被酶催化成為(wei) 有色產(chan) 物，產(chan) 物的量與(yu) 標本中受檢物質的量直接相關(guan) ，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由於(yu) 酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。

進口hth体育下载地址操作步驟:

．從(cong) 已平衡至室溫的密封袋中取出試驗所需板條，未用的板條和幹燥劑請放回鋁箔袋內(nei) 壓 實自封條，密封口袋，放回4℃。

2．空白孔加標準品和標本稀釋液，其餘(yu) 相應孔中加標本或不同濃度標準品(00ul/孔)，用封板膠紙封住反應孔，36℃孵箱孵育90分鍾。

3．提前20分鍾準備化抗體(ti) 工作液。

4．洗板5次。

5．空白孔加化抗體(ti) 稀釋液，其餘(yu) 孔加入化抗體(ti) 工作液(00ul/孔)。用新封板膠紙封住反應孔，36℃孵箱孵育60分鍾。

6．提前20分鍾準備酶結合物工作液。避光室溫(22-25 ) ℃ 放置。

7．洗板5次。

8．空白孔加酶結合物稀釋液，其餘(yu) 孔加入酶結合物工作液(00ul/孔)。用新封板膠紙封住反應孔，36℃孵箱，避光孵育30分鍾。

9．打開酶標儀(yi) 電源，預熱儀(yi) 器，設置好檢測程序。

0．洗板5次。

．加入顯色底物(TMB)00ul/孔，避光36℃孵箱，避光孵育5分鍾。

2．加入終止液00ul/孔, 混勻後即刻測量OD450值(3分鍾內(nei) )。在儀(yi) 器保存讀數結果並打印一份紙質結果。

3．進口hth体育下载地址實驗完畢後將未用完的試劑按規定的保存溫度放回電冰箱保存至有效期結束。 建議保存酶標板框，以備下次或者今後試驗使用。