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進口hth体育下载地址間接法測抗體

發布時間:2022-11-15      點擊次數:471

進口hth体育下载地址間接法是檢測抗體(ti) 常用的方法。其原理為(wei) 利用酶標記的抗抗體(ti) (抗抗體(ti) )以檢測與(yu) 固相抗原結合的受檢抗體(ti) ,故稱為(wei) 間接法。

進口hth体育下载地址操作步驟如下:
)將特異性抗原與(yu) 固相載體(ti) 聯結,形成固相抗原。洗滌除去未結合的抗原及雜質。
2)加稀釋的受檢血清,保溫反應。血清中的特異抗體(ti) 與(yu) 固相抗原結合,形成固相抗原抗體(ti) 複合物。經洗滌後,固相載體(ti) 上隻留下特異性抗體(ti) ,血清中的其他成份在洗滌過程中被洗去。
3)加酶標抗抗體(ti) 。可用酶標抗人Ig以檢測總抗體(ti) ,但一般多用酶標抗人IgG檢測IgG抗體(ti) 。固相免疫複合物中的抗體(ti) 與(yu) 酶標抗體(ti) 抗體(ti) 結合,從(cong) 而間接地標記上酶。洗滌後,固相載體(ti) 上的酶量與(yu) 標本中受檢抗體(ti) 的量正相關(guan) 。
4)加底物顯色本法主要用於(yu) 對病原體(ti) 抗體(ti) 的檢測而進行傳(chuan) 染病的診斷。
間接法的優(you) 點是隻要變換包被抗原就可利用同一酶標抗抗體(ti) 建立檢測相應抗體(ti) 的方法。間接法成功的關(guan) 鍵在於(yu) 抗原的純度。雖然有時用粗提抗原包被也能取得實際有效的結果,但應盡可能予以純化,以提高試驗的特異性。特別應注意除去能與(yu) 一般健康人血清發生反應的雜質,例如以 E.Coli為(wei) 工程酶的重組抗原,如其中含有E.Coli成份,很可能與(yu) 受過E.Coli感染者血甭中的抗E.Coli抗體(ti) 發生反應。抗原中也不能含有與(yu) 酶標抗人Ig反應的物質,例如來自人血漿或人體(ti) 組織的抗原,如不將其中的Ig去除,試驗中也發生假陽性反應。另外如抗原中含有無關(guan) 蛋白,也會(hui) 因竟爭(zheng) 吸附而影響包被效果。間接法中另一種幹擾因素為(wei) 正常血清中所含的高濃度的非特異性。病人血清中受檢的特異性IgG隻占總IgG中的一小部分。IgG的吸附性很強,非特異IgG可直接吸附到固相載體(ti) 上,有時也可吸附到包被抗原的表麵。因此在間接法中,抗原包被後一般用無關(guan) 蛋白質(例如牛血清蛋白)再包被一次,以封閉(blocking)固相上的空餘(yu) 間隙。另外,進口hth体育下载地址在檢測過程中標本須先行稀釋(:40~:200),以避免過高的陰性本底影響結果的判斷。

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