國產(chan) hth体育下载地址克隆化的方法軟瓊脂平板法分析
.國產(chan) hth体育下载地址配2.5%的瓊脂糖30ml,水浴溶化後,移入45℃水浴中。
2.將7ml*DMEM液和3ml0倍濃度的DMEM液混合,置45℃水浴預熱。
3.將瓊脂糖與(yu) DMEM液混合,即為(wei) 含0.5%瓊脂糖的*DMEM液,並加75×08脾細胞。
4.每塊平皿加0ml,於(yu) 室溫中凝固。
5.DMEM中的細胞與(yu) DMEM—瓊脂:混合,將細胞瓊脂混合物2ml鋪於(yu) 凝固的平板上,使其全部覆蓋。
6.放入CO2箱飽和濕度,37℃培養(yang) 0天。
7.用PBS配製0.6%瓊脂糖,於(yu) 沸水浴溶解後,置45℃,在保溫情況下取一試管,國產(chan) hth体育下载地址迅速加入0.ml25%羊紅血球,0.2ml豚鼠補體(ti) ,2.7ml0.6%瓊脂糖。
8.用3ml瓊脂糖—羊紅血球混合液覆蓋克隆。於(yu) 37℃CO2箱孵育h~2h。從(cong) 克隆上部溶解羊紅血球的溶血範圍,可篩選抗羊紅血球Ig。
電話
微信掃一掃