hth体育下载地址質量平衡及實驗標準

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中一般有3次加樣步聚，即加標本，加酶結合物，加底物。加樣時應將所加物加在hth体育下载地址板孔的底部，避免加在孔壁上部，並注意不可濺出，不可產(chan) 生氣泡。
加標本一般用微量加樣器，按規定的量加入板孔中。每次加標本應更換吸嘴，以免發生交叉汙染，也可用一次性的定量塑料管加樣。
有此測定（如間接法ELISA）需用稀釋的血清，可在試管中按規定的稀釋度稀釋後再加樣。也可在板孔中加入稀釋液，再在其中加入血清標本，然後在微型震蕩器上震蕩分鍾以保證混和。加酶結合物應用液和底物應用液時可用定量多道加液器，使加液過程迅速完成。在hth体育下载地址中一般有兩(liang) 次抗原抗體(ti) 反應，即加標本和加酶結合物後。抗原抗體(ti) 反應的完成需要有一定的溫度和時間，這一保溫過程稱為(wei) 溫育（incubation），有人稱之為(wei) 孵育，在ELISA檢測試劑盒中似不恰當。
屬固相免疫測定，抗原、抗體(ti) 的結合隻在固相表麵上發生。以抗體(ti) 包被的夾心法為(wei) 例，加入板孔中的標本，其中的抗原並不是都有均等的和固相抗結合的機會(hui) ，隻有zui貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與(yu) 抗體(ti) 接觸。這是一個(ge) 逐，因此需經擴散
才能達到反應的終點。在其後加入的酶標記抗體(ti) 與(yu) 固相抗原的結合也同樣如此。這就是為(wei) 什麽(me) ELISA檢測試劑盒反應總是需要一定時間的溫育。
溫育常采用的溫度有43℃、37℃、室溫和4℃（冰箱溫度）等。37℃是實驗室中常用的保溫溫度，也是大多數抗原抗體(ti) 結合的合適溫度。在建立ELISA方法作反應動力學研究時，實驗表明，兩(liang) 次抗原抗體(ti) 反應一般在37℃經-2小時，產(chan) 物的生成可達。為(wei) 加速反應，可提高反應的溫度，有些試驗在43℃進行，但不宜采用更高的溫度。抗原抗體(ti) 反應4℃更為(wei) *，在放射免疫測定中多使反應在冰箱中，以形成zui多的沉澱。但因所需時間太長，在hth体育下载地址中一般不予采用。