ELISA檢測試劑盒基礎技術

ELISA檢測試劑盒基礎技術
ELISA檢測試劑盒應用定性夾心免疫檢測技術，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板條，這些多肽是中國型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很強的肽段，分別來自於(yu) 該毒株的開放閱讀框2和開放閱讀框3。將樣品或標準品加入孔中並孵育，如果其中存在HEV IgM抗體(ti) ，這些抗體(ti) 就會(hui) 與(yu) HEV 的多肽抗原結合，並固定在上麵，洗板除去其它非特異性抗體(ti) 和樣品中的其它成份。然後加入羊抗人IgM-HRP（辣根過氧化物酶）酶結合物，經第二次孵育後，酶結合物就會(hui) 與(yu) *次孵育結合上的HEV IgM抗體(ti) 相結合，洗板除去未結合的酶結合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育時會(hui) 發生酶-底物反應，隻有那些含有HEV IgM抗體(ti) 和酶結合物所形成的複合物的孔才會(hui) 發生顏色變化，加入硫酸溶液終止酶和底物間的反應，並在波長: 450nm處測量O.D.值,按照本HEV IgM抗體(ti) elisa試劑盒的測試標準, O.D.值大於(yu) 或等於(yu) Cut-Off值的樣品被認為(wei) 是初試陽性。
ELISA檢測試劑盒基礎技術elisa技術流程
ELISA的基礎是抗原或抗體(ti) 的固相化及抗原或抗體(ti) 的酶標記。結合在固相載體(ti) 表麵的抗原或抗體(ti) 仍保持其免疫學活性，酶標記的抗原或抗體(ti) 既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。在測定時，受檢標本（測定其中的抗體(ti) 或抗原）與(yu) 固相載體(ti) 表麵的抗原或抗體(ti) 起反應。用洗滌的方法使固相載體(ti) 上形成的抗原抗體(ti) 複合物與(yu) 液體(ti) 中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體(ti) ，也通過反應而結合在固相載體(ti) 上。此時固相上的酶量與(yu) 標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物後，底物被酶催化成為(wei) 有色產(chan) 物，產(chan) 物的量與(yu) 標本中受檢物質的量直接相關(guan) ，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由於(yu) 酶的催化效率很高，間接地放大了免疫反應的結果，使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用於(yu) 測定抗原，也可用於(yu) 測定抗體(ti) 。