噬菌體載體

噬菌體(ti) 載體(ti)

（一）l噬菌體(ti) 載體(ti)

. 噬菌體(ti) 的生物學特性

烈性噬菌體(ti) ：隻具有溶菌生長周期

溫和噬菌體(ti) ：具有溶源生長周期和溶菌生長周期

溶菌周期指噬菌體(ti) 將DNA注入寄主細胞後很快環化，然後進行自我複製、蛋白衣殼合成和新噬菌體(ti) 顆粒的組裝，zui後使寄主細胞破裂而釋放出大量的子代噬菌體(ti) 。

溶源周期中，注入寄主細胞的噬菌體(ti) DNA是整合到寄主細胞染色體(ti) 上並可以隨著寄主細胞的分裂而進行複製。

整合了一套完整的噬菌體(ti) 基因組的細菌被稱為(wei) 溶源性細菌。在溶源性細菌內(nei) 存在的整合或非整合的噬菌體(ti) DNA被稱為(wei) 原噬菌體(ti) 。

2. l噬菌體(ti) 的生物學特性

⑴組成：蛋白質外殼和線狀雙鏈DNA分子組成。

lDNA長度為(wei) 48502bp，在分子兩(liang) 端各有2個(ge) 堿基的單鏈互補粘性末端。當其注入到寄主細胞中後，可以迅速通過這兩(liang) 個(ge) 粘性末端的互補作用形成雙鏈的環形DNA分子。上述通過粘性末端互補形成的雙鏈區被稱為(wei) cos位點（cohesive end site）.細胞

⑵是一個(ge) 溫和噬菌體(ti)

一般以溶源生長進行增殖，脅迫條件下也會(hui) 進入溶菌生長周期。

⑶複製

溶源周期隨溶源細菌染色體(ti) 一起複製

溶菌周期的早期是“θ”複製，晚期進行滾環複製

⑷基因組成

lDNA至少包括6個(ge) 基因，大多基因按功能相似性成簇排列，其中一部分為(wei) 噬菌體(ti) 生命活動的必須基因，另一部分約／3為(wei) 非必須區段。

3. l噬菌體(ti) 載體(ti) 的類型

插入型 （Insertion vectors ）

這種載體(ti) 僅(jin) 僅(jin) 有一個(ge) 可供外源DNA插入的克隆位點。

如：λgt0 、 λgt

克隆能力小，不到0kb

置換型 （Replacement vectors）

這種載體(ti) 具有兩(liang) 個(ge) 對應的酶切克隆位點，在兩(liang) 個(ge) 位點之間的λDNA區段是λ噬菌體(ti) 的非必需序列，可以被外源插入的DNA取代。細胞

如Charon 4 載體(ti)

克隆能力大，20～25kb