無菌操作技術

無菌操作技術（細胞培養(yang) ） 

. 實驗進行前，無菌室及無菌操作台（laminar flow） 以紫外燈照射30-60 分鍾滅菌，以70 % ethanol 擦拭無菌操作台麵，並開啟無菌操作台風扇運轉0 分鍾後，才開始實驗操作。每次操作隻處理一株細胞株，且即使培養(yang) 基相同亦不共享培養(yang) 基，以避免失誤混淆或細胞間汙染。實驗完畢後，將實驗物品帶出工作台，以70 % ethanol 擦拭無菌操作台麵。操作間隔應讓無菌操作台運轉0分鍾以上後，再進行下一個(ge) 細胞株的操作。

2. 無菌操作工作區域應保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管、吸取器或吸管盒等可以暫時放置，其它實驗用品用完即應移出，以利於(yu) 氣流之流通。實驗用品以70 % ethanol 擦拭後才帶入無菌操作台內(nei) 。實驗操作應在台麵的無菌區域，勿在邊緣的非無菌區域操
作。

3. 小心取用無菌的實驗物品，避免造成汙染。勿碰觸吸管尖頭部或容器瓶口，亦不要在打開的容器正上方操作實驗。容器打開後，以手夾住瓶蓋並握住瓶身，傾(qing) 斜約45° 角取用，盡量勿將瓶蓋蓋口朝上放置桌麵。

4. 工作人員應注意自身的安全，須穿戴實驗衣及手套後才進行實驗。對於(yu) 來自人類或是病毒感染的細胞株應特別小心操作，並選擇適當等級的無菌操作台（至少Class II）。操作過程中，應避免引起aerosol 的產(chan) 生，小心毒性藥品，例如DMSO 及TPA 等，並避免尖銳針頭的傷(shang) 害等。

5. 定期檢測下列項目：

5.. CO2 鋼瓶的CO2 壓力

5.2. CO2 培養(yang) 箱的CO2 濃度、溫度、及水盤是否有汙染（水盤的水用無菌水，每周更換）。

5.3. 無菌操作台內(nei) 的airflow 壓力，定期更換紫外線燈管及HEPA 過濾膜，預濾網（300小時/預濾網，3000 小時/HEPA）。

6. 水槽可添加消毒劑（Zephrin :750），定期更換水槽的水。細胞