動物的選擇與免疫

一、動物的選擇 

    目前應用zui廣的是小白鼠和大白鼠，尤以小白鼠為(wei) 好。就品係而言以Balb/c小白鼠應用zui廣，因為(wei) 所有的小白鼠骨髓瘤係均從(cong) Balb/c小白鼠係誘導出來。Balb/c係小白鼠必須用純係的，雌雄均可，以8~2周齡為(wei) 宜。大白鼠也可，能產(chan) 生較多量的單抗體(ti) 。現在已經在小鼠雜交瘤的基礎上，發展了小鼠－大鼠，小鼠－人以及人－人雜交瘤技術。

二、免疫

    一般而言，抗原的純度不很重要，特別是免疫原性較強的抗原。免疫程序、劑量和方法是關(guan) 係到是否能得到所需要的單抗體(ti) 的關(guan) 鍵之一。正常小鼠脾髒含有能產(chan) 生各種不同抗體(ti) 的B淋巴細胞，一隻純種小白鼠估計能產(chan) 生.0×07~5.0×07種不同的抗體(ti) 。因此一隻正常的小白鼠的脾細胞與(yu) 小鼠骨髓瘤融合，隻能有千萬(wan) 分之一的機會(hui) 獲得某一種特定抗體(ti) 。所以為(wei) 了提高得到某種雜交瘤的機會(hui) ，必須加強免疫，使產(chan) 生特異性抗體(ti) 的B淋巴細胞大量增加。B淋巴細胞的不同發育階段對獲得陽性雜交瘤也有很大影響。有人認為(wei) 處在轉化時期的B淋巴細胞可能更易於(yu) 融合，而免疫以後7~8天，雖然是抗體(ti) 產(chan) 生的高峰時期，但形成有活力的雜交瘤細胞的可能反而減少。故一般認為(wei) 加強免疫後的第三天應殺鼠取脾做細胞融合。 

. 可溶性抗原（蛋白質） 以mg/ml～5mg/ml的溶液加等量的弗氏*佐劑乳化，分多點小鼠皮下注射，總量為(wei) 0.3ml～0.6ml，間隔3-5周再同樣注射一次，0天後，斷尾取血一滴，測抗體(ti) 效價(jia) ，選滴度高的小鼠做融合試驗。一個(ge) 月後可以經靜脈（尾靜脈）給予無佐劑抗原0.2ml～0.4ml，3～4天後，殺死小鼠取脾做融合用。

2. 顆粒性抗原 如抗原來源方便，可以不加佐劑而增加免疫次數，縮短間隔時間。例如用羊紅血球免疫小白鼠，以%濃度每隻皮下注射0.2ml，每周2次，共免疫5-8次，取脾前3天，再免疫一次即可。有人認為(wei) zui後一次免疫劑量要大，大到近於(yu) 免疫耐受的程度更好。