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免疫測定中的幹擾機製

發布時間:2022-11-15      點擊次數:484

    HA 的產(chan) 生機製至今還不能闡明,目前所使用的免 疫試劑抗體(ti) 大多源於(yu) 實驗動物,因此,體(ti) 內(nei) 含HA 的患者在做血清免疫檢測時,HA 可與(yu) 試劑抗體(ti) 結合而導致幹擾。HA 通常與(yu) 試劑抗體(ti) 的Fc 區表位或者F(ab’)2 區域的決(jue) 定簇結合。目前公認的HA 在免疫測定中的幹擾機製主要發生在夾心免疫測定法和競爭(zheng) 免疫測定法中。  

HA在夾心免疫測定法中的幹擾機製

    ELISA夾心法測定中,HA與(yu) 試劑抗體(ti) (捕獲抗體(ti) 和標記抗體(ti) )的結合,可通過Fc-Fc 和Fab-Fab兩(liang) 種結合方式幹擾測定。正常情況下,在ELISA 夾心法中,待測抗原同時與(yu) 捕獲抗體(ti) 和標記抗體(ti) 結合,形成了固相捕獲抗體(ti) -待測抗原-標記抗體(ti) 的複合物。在以Fc-Fc 的方式結合的機製中,HA的Fc 端結合到捕獲抗體(ti) 的Fc 段上,而HA的Fab 區域則結合到標記抗體(ti) 的Fab 區域上,導致假陽性結果。在以Fab-Fab 結合方式的機製可引起假陽性或假陰性的結果,如HA的Fab區域通過分別結合捕獲抗體(ti) 的Fab區域和標記抗體(ti) 的Fab 區域,阻擋捕獲抗體(ti) 和標記抗體(ti) 與(yu) 待測抗原的結合,從(cong) 而導致假陰性;HA的F(ab’)2 通過同時結合捕獲抗體(ti) 的Fab區域和標記抗體(ti) 的Fab區域,形成固相捕獲抗體(ti) -HA-標記抗體(ti) 複合物,如果標本中無待測抗原,HA就引起假陽性的結果。

HA在競爭(zheng) 免疫測定法中的幹擾機製

    在免疫競爭(zheng) 法測定中,HA幹擾也可造成假陽性或假陰性。在正常的競爭(zheng) 性免疫反應中,待測抗原與(yu) 標記抗原競爭(zheng) 的結合到連接在載體(ti) 上的捕獲抗體(ti) ,形成正常的反應複合物。但是如果反應體(ti) 係中存在HA,測定結果將可能出現假陽性或假陰性的現象。造成假陰性結果的機製:HA通過同時結合捕獲抗體(ti) 和標記抗原,形成異常的反應複合物,幹擾捕獲抗體(ti) 結合檢測抗原,消耗可結合待測抗原的捕獲抗體(ti) ,從(cong) 而導致假陰性。造成假陽性結果的機製:HA直接結合捕獲抗體(ti) 與(yu) 抗原結合的部位,形成異常的複合物,占據捕獲抗體(ti) 結合待測抗原或標記抗原的結合空間,消耗可結合待測抗原或標記抗原的捕獲抗體(ti) ,導致假陽性。

3-位點免疫檢測法中的幹擾機製

    該幹擾存在於(yu) 肌鈣蛋白I的免疫檢測中。所謂的3-位點是試劑盒中含有針對肌鈣蛋白I分子上3個(ge) 不同抗原決(jue) 定簇的3種抗體(ti) ,肌鈣蛋白I可以同時結合2個(ge) 捕獲抗體(ti) 與(yu) 個(ge) 示蹤抗體(ti) 或者個(ge) 捕獲抗體(ti) 與(yu) 2個(ge) 示蹤抗體(ti) ,使特異性和靈敏度大大提高,後者可使反應的靈敏度進一步增高。由於(yu) 肌鈣蛋白I 3-位點免疫測定增加了一種捕獲抗體(ti) 或者標記抗體(ti) ,這也同時提高了捕獲抗體(ti) 或者標記抗體(ti) 與(yu) HA結合的機率,從(cong) 而導致肌鈣蛋白I 3-位點免疫測定比肌鈣蛋白I 雙位點免疫測定更加容易受到HA的幹擾,結合的部位與(yu) 上述兩(liang) 種機製相似。


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