小鼠IgG hth体育下载地址操作步驟

小鼠IgG hth体育下载地址基本原理：
    本實驗采用雙抗體(ti) 夾心 ELISA法。用抗小鼠IgG單抗包被於(yu) 酶標板上，標準品和樣品中的 IgG與(yu) 單抗結合，加入酶標抗體(ti) ，形成免疫複合物連接在板上，加入酶底物TMB，出現藍色，加終止液硫酸，顏色變黃，在450nm處測OD值，IgG濃度與(yu) OD值成正比，可通過繪製標準曲線求出標本中IgG濃度。
小鼠IgG hth体育下载地址操作步驟
    實驗開始前，各試劑均應平衡至室溫（試劑不能直接在37℃溶解）；試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。實驗前應測量樣品含量，如樣品濃度過高時，應對樣品進行稀釋，以使稀釋後的樣品符合試劑盒的檢測範圍，計算時再乘以相應的稀釋倍數。
. 加樣：分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液00μl，餘(yu) 孔分別加標準品或待測樣品00μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻，酶標板加上蓋或覆膜，37℃反應20分鍾。為(wei) 保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。hth体育下载地址
2. 棄去液體(ti) ，甩幹，不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 00μl（在使用前一小時內(nei) 配製），酶標板加上覆膜, 37℃反應60分鍾。
3. 溫育60分鍾後，棄去孔內(nei) 液體(ti) ，甩幹，洗板3次，每次浸泡-2分鍾，大約400μl/每孔，甩幹（也可輕拍將孔內(nei) 液體(ti) 拍幹）。 
4. 每孔加檢測溶液B工作液（同檢測A工作液） 00μl，酶標板加上覆膜37℃反應60分鍾。
5. 溫育60分鍾後，棄去孔內(nei) 液體(ti) ，甩幹，洗板5次，每次浸泡-2分鍾，350μl/每孔，甩幹（也可輕拍將孔內(nei) 液體(ti) 拍幹）。
6. 依序每孔加底物溶液90μl，酶標板加上覆膜37℃避光顯色（30分鍾內(nei) ，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度蘭(lan) 色，後3-4孔梯度不明顯，即可終止）。hth体育下载地址
7. 依序每孔加終止溶液50μl，終止反應，此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與(yu) 底物液的加入順序相同。為(wei) 了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到後應盡快加入終止液。
8. 用酶聯儀(yi) 在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液後立即進行檢測。