hth体育下载地址測定步驟:固相包被→加待測樣品→溫育→洗滌+加酶標物→溫育→洗滌→加底物→溫育一加終止液→比色→判定結果。
hth体育下载地址操作較繁雜,在操作中應注意以下5個(ge) 方麵。
. 隨著病情的進展或由其他因素影響,某些抗體(ti) 在機體(ti) 內(nei) 的含量發生大幅波動,因此有必要對標本進行預處理。間接法測定中,標本適當稀釋還可降低非特異性反應。
2. 加樣一般使用加液器,在hth体育下载地址中一般有4次加樣:加標本、加酶結合物、加底物和加終止液。加標本時必須每份標本使用一支移液器吸嘴,以免交叉汙染。加酶結合物、底物和終止液時則不需更換吸嘴。
3. 在成批手工檢測中,還應注意操作時差的影響。加樣及混勻時間的差異,使抗原抗體(ti) 反應和酶促反應時間不一致,對競爭(zheng) 法及定量檢測影響很大,不注意可能會(hui) 導致錯誤結果或定量不準。
4. 洗滌是hth体育下载地址操作過程中決(jue) 定實驗成敗的一個(ge) 關(guan) 鍵步驟。目的是除去未結合的免疫反應物,終止抗原抗體(ti) 反應,除去標本中與(yu) 反應無關(guan) 的成分、遊離的酶標物以及反應過程中吸附於(yu) 固相載體(ti) 上的非特異性物質。可用洗板機洗板或手工洗板,前者洗滌質量較好,各反應孔洗滌效果均一,批內(nei) 、批間差異小,手工洗板應注意控製各孔洗滌效果,差異不宜太大。
5. 準確判定結果須使用hth体育下载地址測讀儀(yi) ,比色法判讀可選擇單波長或雙波長,根據反應液顏色的不同選用不同波長的濾光片,以空白孔校零測定反應孔的吸光度值。酶標儀(yi) 具有良好的重複性。
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