免疫組化實驗操作

. 抗體(ti) 稀釋

應遵循“現用現配”的原則，對於(yu) PBS稀釋的抗體(ti) 一定要當天使用。

2. 背景高

在抗體(ti) 濃度、反應時間、反應溫度等合適的條件下，如果背景依舊高，可采用含‰ Tween20的PBS洗，特別是在顯色之前要多洗。

3. 返藍

在蘇木素複染後，可用堿性緩衝(chong) 液（如PBS）或Na2HPO4的飽和溶液返藍。

4. 顯色

一定要在顯微鏡下觀察，注意控製背景。

在整個(ge) 操作過程中，切片千萬(wan) 不能幹燥，否則會(hui) 有非特異性染色。抗體(ti)

5.拍照

免疫組化切片一般染色不太深，因此拍攝出的照片顏色較淺，就讓它淺。拍攝出的照片中空白部位應盡可能呈現純白色。測量其灰度應在250左右。如果呈現淡藍色，一般是相機自動白平衡在起作用。另外一個(ge) 因素是顯微鏡燈光電壓不正確。要使燈光本身的色溫正確。既不偏黃，也不偏藍。