大鼠極低密度脂蛋白（VLDL）elisa試劑盒銷售說明書

大鼠極低密度脂蛋白（VLDL）elisa試劑盒銷售說明書(shu)

使用目的：
本大鼠極低密度脂蛋白試劑盒用於(yu) 測定大鼠血清、血漿及相關(guan) 液體(ti) 樣本中極低密度脂蛋白（VLDL）含量。
實驗原理
本大鼠極低密度脂蛋白試劑盒應用雙抗體(ti) 夾心法測定標本中大鼠極低密度脂蛋白（VLDL）水平。用純化的大鼠極低密度脂蛋白（VLDL）抗體(ti) 包被微孔板，製成固相抗體(ti) ，往包被單抗的微孔中依次加入極低密度脂蛋白（VLDL），再與(yu) HRP標記的極低密度脂蛋白（VLDL）抗體(ti) 結合，形成抗體(ti) -抗原-酶標抗體(ti) 複合物，經過*洗滌後加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，並在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的極低密度脂蛋白（VLDL）呈正相關(guan) 。用酶標儀(yi) 在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠極低密度脂蛋白（VLDL）濃度。 
試劑盒組成 
30倍濃縮洗滌液 20ml×瓶 7 終止液 6ml×瓶
2 酶標試劑 6ml×瓶 8 標準品（240μg/ml） 0.5ml×瓶
3 酶標包被板 2孔×8條 9 標準品稀釋液 .5ml×瓶
4 樣品稀釋液 6ml×瓶 0 說明書(shu) 份
5 顯色劑A液 6ml×瓶 封板膜 2張 
6 顯色劑B液 6ml×/瓶 2 密封袋 個(ge)
標本要求 
．大鼠極低密度脂蛋白標本采集後盡早進行提取，提取按相關(guan) 文獻進行，提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放於(yu) -20℃保存，但應避免反複凍融
2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑製辣根過氧化物酶的（HRP）活性。
操作步驟
. 標準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
20μg/ml 5號標準品 50μl的原倍標準品加入50μl標準品稀釋液
60μg/ml 4號標準品 50μl的5號標準品加入50μl標準品稀釋液
30μg/ml 3號標準品 50μl的4號標準品加入50μl標準品稀釋液
5μg/ml 2號標準品 50μl的3號標準品加入50μl標準品稀釋液
7.5μg/ml 號標準品 50μl的2號標準品加入50μl標準品稀釋液
2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其餘(yu) 各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然後再加待測樣品0μl（樣品zui終稀釋度為(wei) 5倍）。加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3. 溫育：用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾。 
4. 配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋後備用
5. 洗滌：大鼠極低密度脂蛋白小心揭掉封板膜，棄去液體(ti) ，甩幹，每孔加滿洗滌液，靜置30秒後棄去，如此重複5次，拍幹。
6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 
7. 溫育：操作同3。
8. 洗滌：操作同5。
9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色5分鍾.
0. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液後5分鍾以內(nei) 進行。