兔一氧化氮（NO）hth体育下载地址實驗步驟說明

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.標準品的稀釋：兔一氧化氮（NO）hth体育下载地址提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

2.加樣：兔一氧化氮（NO）hth体育下载地址分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其餘(yu) 各步操作相同）、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然後再加待測樣品0μl（樣品zui終稀釋度為(wei) 5倍）。加樣將樣品加於(yu) 酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3.溫育：用封板膜封板後置37℃溫育30分鍾。  

4.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋後備用

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體(ti) ，甩幹，每孔加滿洗滌液，靜置30秒後棄去，如此重複5次，拍幹。

6.加酶：兔一氧化氮（NO）hth体育下载地址每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色5分鍾.

0.終止：兔一氧化氮（NO）hth体育下载地址每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液後5分鍾以內(nei) 進行。

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