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向培養基細胞裏麵加入生長因子的方法討論

發布時間:2022-11-15      點擊次數:546

向培養基細胞裏麵加入生長因子的方法討論

  生長因子絕大多數哺乳類胚胎神經元有嚴(yan) 格的營養(yang) 要求,若不能提供適宜的生長因子或合適的因子組分,將會(hui) 使絕大多數神經元在體(ti) 外培養(yang) 的數天中死亡。解決(jue) 這一問題有兩(liang) 條思路,一是讓培養(yang) 基細胞提供自己的營養(yang) 因子,二是在培養(yang) 基中加入純的生長因子。如果細胞混合物能在高密度時生長,所需的生長因子便會(hui) 積累到可觀的數值,尤其當培養(yang) 基很少變化時。若某種細胞混合物生長時有很少的營養(yang) 需求,可保持培養(yang) 基在一段時間裏不作任何變動,以使營養(yang) (生長)因子積累,而zui後促使所需要的細胞類型能夠生長。但是,這種對營養(yang) (生長)因子自身倚賴性亦有弊端,因為(wei) 通常在混合細胞群體(ti) 中細胞很難有同比例增殖,某些細胞會(hui) 因生長條件的貧乏而受限製。另外,這種方法隻能進行相當高密度的細胞培養(yang) 。因為(wei) 培養(yang) 基的條件在細胞的較低密度時變的不夠有效。不過某些時候純化神經元群體(ti) 的低密度培養(yang) 可用條件培養(yang) 基(經過了高密度培養(yang) )進行,或在膠質上生長的神經元所用過的培養(yang) 基來支持。

  滿足神經元營養(yang) 需求的第二條途徑是向培養(yang) 基中加入生長因子。通常用於(yu) 組培的通用適宜因子是神經生長因子NGF。不過,隻有少數對這種蛋白質有反應的細胞類型的細胞才能生長。

含225ml LB肉湯均質袋 0個(ge) /包 用於(yu) 李斯特氏菌製樣和前增菌培養(yang) (GB 標準)
LB Broth
萘啶酮酸 5.0mg/支*5 每支添加於(yu) 225ml HBJ005中製成LB肉湯
Nalidixic Acid
吖啶黃素 3.0mg/支*5 培養(yang) 基每支添加於(yu) 225ml HBJ005中製成LB肉湯
Acridine Flavin
含225ml FB增菌液均質袋 0個(ge) /包 用於(yu) 李氏菌前增菌培養(yang) (SN 標準)
FB Broth
FB(Half-Fraser)添加劑(A、B) 2ml/支*40 每支添加到225ml HBJ006中
FB additive(A、B)
含225ml GN增菌液均質袋 0個(ge) /包 用於(yu) 誌賀氏菌前增菌培養(yang)
GN Enrichment Broth
含00ml GN增菌液均質袋 0個(ge) /包 用於(yu) 誌賀氏菌前增菌培養(yang)
GN Enrichment Broth
含225ml誌賀氏菌増菌肉湯均質袋 0個(ge) /包 用於(yu) 誌賀氏菌前增菌培養(yang)
Shigella Enrichment Broth
新生黴素 ml/支*5 每支添加於(yu) 225ml HBJ8663中
Novobiocin
培養(yang) 基含225ml 7.5%氯化鈉肉湯均質袋 0個(ge) /包 用於(yu) 金葡菌前增菌培養(yang)
7.5% NaCl Broth
含50ml 7.5%氯化鈉肉湯均質袋 0個(ge) /包 用於(yu) 金葡菌增菌培養(yang)
7.5% NaCl Broth
含225ml 0%氯化鈉胰酪腖大豆肉湯均質袋 0個(ge) /包 用於(yu) 金葡菌前增菌培養(yang)
0% NaCl Trypticase Soy Broth
含225ml布氏肉湯均質袋 0個(ge) /包 用於(yu) 空腸彎曲菌的前增菌
Brucella Broth

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