柱式土壤DNAout

柱式土壤DNAout
產(chan) 品及特點 本產(chan) 品是整合天澤基因土壤DNAOUT（CAT：6070）和柱式腐殖酸清除劑（CAT：6080）兩(liang) 個(ge) 產(chan) 品而得的柱式升級產(chan) 品。它結合了兩(liang) 者的優(you) 點，專(zhuan) 門用於(yu) 從(cong) 各種土壤樣品和河海沉積物中提取高質量的DNA的試劑。跟土壤DNAOUT相比它具有下列特點：
. 去汙染效果更好，得到的DNA可以直接作為(wei) PCR模板或酶切，不需要再進行去腐殖酸處理。
2. 操作過程更加簡單快速，整個(ge) 操作隻需要0多分鍾，擴容性好。
3. 產(chan) 量高，每克土壤一般可以提取到5-50 ug DNA，片段長度在20-50 Kb，OD260/280一般都在.8以上。
4. 適合於(yu) 各種土壤（包括河海沉積物）。
規格及成分 成 份 50次包裝
溶液A 25 mL
溶液B 25 mL
溶液C 40 mL
離心吸附柱 50套
通用洗柱液 50 mL
通用洗脫液 0 mL
使用手冊(ce) 份

運輸及保存 常溫運輸及保存，保存期為(wei) 一年。
自備試劑 氯仿。
使用方法 . 65℃預熱溶液A，待其沉澱溶化後充分混勻，取0.5 mL加入到.5 mL塑料離心管中並放置於(yu) 65℃待用。
2. 稱取0.-0.3 g的土壤，加入到含預熱溶液A的離心管中，震蕩器上劇烈震蕩5-0分鍾。如果是擴量操作，可以使用更多土壤和較大離心管。也可以將同一種土壤在較大離心管中震蕩處理，然後再分到.5 mL離心管中。注意:不論使用大的還是小的離心管，一定要讓管底的土壤震蕩起來。
3. 將離心管置於(yu) 65℃水浴中保溫至少5分鍾。
4. 2000-5000 g室溫離心3分鍾，將上清轉移到一新離心管中（上清液一般呈淡黃色或深棕色，實際顏色取決(jue) 於(yu) 腐殖酸的含量，上清液的體(ti) 積一般為(wei) 300-400 µL）。
5. 在上清液中加入等體(ti) 積的溶液B，上下顛倒30秒充分混勻，溶液將呈白色或淡黃色混濁狀。
6. 將離心管冰浴至少5分鍾。
7. 2000-5000 g室溫離心3分鍾，轉移上清到新的.5 mL離心管中，上清液顏色將比第4步得到的上清的顏色稍淡，體(ti) 積在0.7 mL左右。
注意：下麵第8-第9步的氯仿抽提操作可以省略，直接進入第0步，但DNA的產(chan) 量會(hui) 低50%左右，OD260/280在.7-.8。如果直接進入第0步，則轉移的溶液體(ti) 積不要超過0.6 mL，否則沒有空間加溶液C。
8. 加入0.2 mL的氯仿（自備），震蕩器上充分振蕩30秒混勻。注意:一定要讓管底的溶液震蕩起來。
9. 2000-5000 g室溫離心3分鍾，小心轉移上清到新離心管中。說明：離心後兩(liang) 相交界麵將有白色膜狀物，其中有機相部分顏色較深，一般呈淡棕色。上清的顏色取決(jue) 於(yu) 土壤中腐殖酸的含量。將上清轉移到新的.5 mL離心管時，不要超過0.6 mL，否則沒有空間加溶液C。如果有多餘(yu) 的可以棄之不用。
0. 加入.5倍體(ti) 積的溶液C，上下顛倒30秒混勻。
. 分兩(liang) 次上柱（即先轉移一半的混合液到離心吸附柱中，2000-5000 g室溫離心半分鍾，棄穿透液，然後再將剩下的混合液到離心吸附柱中，2000-5000 g室溫離心半分鍾，棄穿透液）。
2. 加0.7 mL通用洗柱液到離心吸附柱中，2000-5000 g室溫離心半分鍾，棄穿透液。
3. 如果有必要，可以再加0.3 mL通用洗柱液到離心吸附柱中，2000-5000 g室溫離心半分鍾，棄穿透液。增加一步洗滌能使zui後得到的DNA的純度稍有提高，但產(chan) 量稍微有所降低。
4. 2000-5000 g室溫再離心半分鍾。此步十分重要，否則殘留的通用洗柱液會(hui) 汙染DNA。
5. 將離心吸附柱轉移到一新的.5 mL塑料離心管中，加入50-00 uL 通用洗脫液。
6. 室溫放置離心吸附柱-2分鍾。
7. 2000-5000 g室溫離心半分鍾，離心管中溶液即為(wei) DNA樣品，可以立即使用或存放於(yu) 冰箱待用。