HCG在放射免疫法中的測定

 詳情請看：HCG在放射免疫法中的測定

一、原理

HCG是放射性同位素標記技術與(yu) 抗原抗體(ti) 免疫反應相結合的超微量分析法，是用放射性核素（如25I/3H）標記的極微量的示蹤抗原*（Ag*）/抗體(ti) *（Ab*）與(yu) 待測抗原Ag/抗體(ti) Ag）一起來競爭(zheng) 結合有限的特異性抗體(ti) （Ab）/抗原（Ag），故稱飽和分析或競爭(zheng) 抑製法，其反應過程為(wei) ：Ag*•Ab量固定，Ag*+Ag>Ab可結合的數目（抗原過量），Ag*與(yu) Ag競爭(zheng) 結合Ab，直到反應達到平衡，形成的AD*•Ab量隨著Ag量改變：Ag量大，與(yu) Ab結合的機會(hui) 多，Ag*•．Ab少，反之，則形成的Ag*•．Ab多。Ag量與(yu) Ag*．Ab量之間可以競爭(zheng) 抑製曲線表示。

二、方法

放射免疫測定必須有3種基本試劑：

（）能與(yu) 待測物（配體(ti) ）專(zhuan) 一結合的結合試劑，通常是專(zhuan) 一抗體(ti) 受體(ti) ；

（2）具有放射活性的配體(ti) 標記物，常用的核素有25I及3He；

（3）能將與(yu) 試劑結合的配體(ti) 與(yu) 未結合的配體(ti) 分離的分離試劑。

在競爭(zheng) 性測定中，加入定量的抗體(ti) 和標記配體(ti) ，反應中未標記配體(ti) （待測物）與(yu) 標記配體(ti) 競爭(zheng) 結合試劑，未標記配體(ti) 的量愈多，標記配體(ti) 與(yu) 抗體(ti) 相結合的概率就愈低，從(cong) 而標記配體(ti) 的結合部分（B）低，經過一定時間抗體(ti) 與(yu) 配體(ti) 的結合達到平衡狀態後，可用分離試劑結合的配體(ti) （B）與(yu) 未結合的配體(ti) （F）分離，用計數器計數結合部分（B）標本中的HcG量可通過比較標本B的計數與(yu) 標準品的計數（標準曲線）求得。

（）25碘一尿HCG（PEG）藥盒組分包括：HCG標準管6瓶，凍幹；HCG抗體(ti) （藍色）瓶，凍幹；25碘一HCG（紅色）瓶，凍幹；正常兔血清5瓶，凍幹；磷酸鹽緩衝(chong) 液瓶，溶液；PEG 瓶，溶液。曲線範圍50～200Iu/L。

標準曲線：以標準濃度為(wei) 橫坐標，以結合率為(wei) 縱坐標，繪製標準曲線，依此求得標本的HCG一β濃度。

正常參考值：<250U/L。

保存：2～8℃。

有效期：35天。

（2）25碘一HCG（PR=免疫分離試劑）藥盒組分包括：HCG標準6瓶，凍幹；HCG抗體(ti) （藍色）瓶，凍幹；25碘一HCG（紅色）瓶，凍幹；NSB 瓶，溶液；溫育液l瓶，溶液；PR 瓶，溶液。

曲線範圍：25～2000Iu/L。

靈敏度：<25IU/L。

標準曲線：以標準濃度為(wei) 橫坐標，以結合率為(wei) 縱坐標繪製標準曲線，以此求得標本的HCG一β濃度。

正常參考值：<00Iu/L。

保存：2～8℃。

有效期：35天。

（3）25碘一HCG—B（DAP=雙抗+PEG）藥盒組份包括：

HCG標準6瓶，凍幹；HCG—B抗體(ti) （藍色）瓶，凍幹；25碘一HCG（紅色）瓶，凍幹；DA 2瓶，凍幹；溫育液瓶，溶液；PEG 瓶，溶液。

曲線範圍：5～320Iu/L。

靈敏度：5IU/L。

特異性：抗HCG—B血清與(yu) LH的交叉反應率<5%。

標準曲線：以標準濃度為(wei) 橫坐標，以結合率為(wei) 縱坐標繪製標準曲線，以此求得HCG—β濃度。

正常參考值：<20Iu/L。

保存：2～8℃。

有效期：35天。