RT-PCR試劑盒先利用反轉錄酶M-MLVRTase將RNA反轉錄成cDNA,再以cDNA為(wei) 模板利用biotekeTaq在同一反應管內(nei) 連續進行RealTimePCR擴增反應(使用SYBRGreenI嵌合熒光法)。本製品是采用SYBRGreenI嵌合熒光法進行RealTimeOneStepRT-PCR反應的專(zhuan) 用試劑。RealTimePCR方法以其快速性及定量性被廣泛應用於(yu) 科研領域,使用本製品進行RealTimeRT-PCR反應可在同一反應管內(nei) 連續進行,操作簡單,並能有效防止汙染。本反應體(ti) 係由於(yu) 可以對擴增產(chan) 物進行實時檢測,大大提高了檢測靈敏度,並省略了PCR反應後的電泳步驟,非常適合於(yu) RNA病毒等微量RNA的檢測。
RT-PCR試劑盒的儲(chu) 存條件:
14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
1.血清:使用不含熱原和內(nei) 毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液後,3000轉離心10分鍾將血清和紅細胞迅速小心地分離。
2.血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000轉離心30分鍾取上清。
3.細胞上清液:3000轉離心10分鍾去除顆粒和聚合物。
4.組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000轉離心10分鍾取上清。
5.保存:如果樣本收集後不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存於(yu) -20℃,避免反複凍融,在室溫下解凍並確保樣品均勻地充分解凍。
RT-PCR試劑盒特點優(you) 勢:
1.特異性:所有產(chan) 品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為(wei) 種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到。
2.重現性:該係列所有產(chan) 品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為(wei) 。
3.靈敏性:該係列產(chan) 品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4.檢測範圍廣,涵蓋了對人體(ti) 危害較為(wei) 嚴(yan) 重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨(lin) 床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個(ge) 檢測過程為(wei) 3-4個(ge) 小時。
5.序列資源豐(feng) 富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從(cong) 理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6.該係列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐(feng) 富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20餘(yu) 種標準菌株和臨(lin) 床菌株的保守性驗證及40餘(yu) 種近緣標準菌株和臨(lin) 床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會(hui) 出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
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